[发明专利]一种急性分离心肌细胞的方法及装置

权利要求书

1.一种急性分离心肌细胞的方法，其特征在于，包括以下操作：

1）将离体的心脏行主动脉逆行插管后，将心脏悬挂于Langendorff灌流装置中，用消化液37℃恒温恒流灌流心脏；

所述的消化液为：心脏灌流液30ml、胶原酶I30mg充分混合；

所述的心脏灌流液：MEM5.55g、HEPES sodium salt2.00g、BSA0.5g、去离子水500ml充分混合，pH为7.40；

2）采用pH计监测分离过程中消化液pH的变化，依据监测结果，每隔一定的时间加入碱液调节消化液pH为7.40，消化全程维持pH的稳定；

3）当消化完成后，取出心脏经剪碎吹打，获得急性分离的心肌细胞。

2.如权利要求1所述的急性分离心肌细胞的方法，其特征在于，所述的消化液用质量浓度1%的氢氧化钠溶液来调节其pH。

3.如权利要求1所述的急性分离心肌细胞的方法，其特征在于，所述的消化液灌注的流速在8～10ml/min之间。

4.如权利要求1所述的急性分离心肌细胞的方法，其特征在于，每隔2.5min加入质量浓度1%的氢氧化钠溶液调节消化液pH，使其稳定的维持在7.40。

5.如权利要求1所述的急性分离心肌细胞的方法，其特征在于，所述的消化液灌注时间不超过50min。

6.如权利要求1所述的急性分离心肌细胞的方法，其特征在于，所述的消化液在室温配制液体时，将pH值调至7.50；当其在37℃恒温灌注时，消化液的pH值随着温度升高会逐渐下降至7.40。

7.如权利要求1所述的急性分离心肌细胞的方法，其特征在于，当心脏表面颜色变为红白相间，血管轮廓模糊，心脏整体由硬变软，冠脉压力由低升高后再降至消化初始压力时，认为是终止消化的指标，消化完成。

8.一种急性分离心肌细胞的装置，其特征在于，包括：

langendorff装置：维持消化液沿管路循环灌注心脏冠脉系统；

蠕动泵：设置在消化液循环回路上，维持消化液灌注的流速在8～10ml/min之间；

恒温装置：维持消化期间消化液温度于37℃；

压力传感器：监测心脏冠脉内压力，并将检测结果发送给控制单元；

pH计：监测消化液pH值，并将检测结果发送给控制单元；

控制单元：显示所接收的心脏冠脉内压力和消化液pH值，并每隔一段时间控制微量泵向消化液循环管路泵入碱液，维持调节消化液pH为7.40；

微量泵：接收控制单元发出的指令后，向消化液循环管路泵入碱液。