[发明专利]液相-串联质谱同时检测9种端基炔类激素的方法

权利要求书

1.一种液相-串联质谱同时检测多种端基炔类激素的方法，包括：通过点击反应使待测样品在电喷雾电离下能带上电荷，从而能检测到衍生好的待测物；其中所述点击反应包括以下具体步骤：

1)、生物基质血清中点击反应前处理步骤

于2mL pp管中按顺序加入下列反应物：纯水或血清，混标，DMSO、内标炔诺酮-d6、H₂O、(s)-2-叠氮-3-甲基丁酸·环己铵盐、CuSO₄溶液、NaAsc溶液，涡旋1min后，放入37℃恒温振荡仪中反应4h，取出后加入EtOAc，涡旋1min，然后离心，取上层清液，置于氮吹仪中吹干，用CH₃OH复溶，进样，其中每个反应平行做两个样；或

2)、生物基质尿液中点击反应前处理步骤

于2mL pp管中按顺序加入下列反应物：纯水或尿液，混标，DMSO、内标炔诺酮-d6、H₂O、(s)-2-叠氮-3-甲基丁酸·环己铵盐、CuSO₄溶液、NaAsc溶液，涡旋1min后，放入37℃恒温振荡仪中反应4h，取出后加入EtOAc，涡旋1min，然后离心，取上层清液，置于氮吹仪中吹干，用CH₃OH复溶，进样，其中每个反应平行做两个样。

2.如权利要求1所述的方法，其中个，步骤1)中每200μL纯水或血清加入混标50μL、MMSO150μL、50ng/mL的内标炔诺酮-d610μL、H₂O50μL、500μg/mL(s)-2-叠氮-3-甲基丁酸·环己铵盐20μL、20mM CuSO₄溶液10μL和5mM NaAsc溶液10μL，反应后加入的所述EtOAc为1ml，用100μL CH₃OH复溶。

3.如权利要求1所述的方法，其中，所述混标为变量。

4.如权利要求1所述的方法，其中，步骤1)中，所述离心的具体条件是：10000g，5min。

5.如权利要求1所述的方法，其中个，步骤2)中每200μL纯水或血清加入混标50μL、MMSO150μL、50ng/mL的内标炔诺酮-d610μL、H₂O50μL、500μg/mL(s)-2-叠氮-3-甲基丁酸·环己铵盐20μL、CuSO₄溶液10μL和NaAsc溶液10μL，反应后加入的所述EtOAc为1ml，用100μL CH₃OH复溶，CuSO₄溶液为25mM，NaAsc溶液为40mM。