[发明专利]一种马缨杜鹃组织培养快速繁殖方法有效
申请号: | 201310324529.4 | 申请日: | 2013-07-30 |
公开(公告)号: | CN103371103A | 公开(公告)日: | 2013-10-30 |
发明(设计)人: | 朱春艳;顾宏辉;余金良;朱丹华;盛小光 | 申请(专利权)人: | 杭州植物园 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 杭州丰禾专利事务所有限公司 33214 | 代理人: | 王从友 |
地址: | 310013 *** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 种马 杜鹃 组织培养 快速 繁殖 方法 | ||
1.一种马缨杜鹃组织培养快速繁殖方法,其特征在于该方法按如下步骤进行:
1)外植体的选择:春季或秋季从已开花马缨杜鹃母株上剪取带有4-6个潜伏芽的当年生新发枝条;
2)外植体灭菌:剪去枝条叶片,先用自来水浸泡并冲洗30-60分钟,用洗洁精洗涤1-2次后吸干;然后,在无菌室超净台上用75%酒精消毒15-30秒,用无菌水冲洗3-5遍,再用0.1%氯化汞消毒12-15分钟,最后用无菌蒸馏水冲洗3-5遍后吸干;
3)新发枝条诱导培养:将灭好菌的枝条切除茎尖,余下的枝条剪成2-3cm长的茎段,每段带有1-2个腋芽,斜插入诱导培养基中;于23-26℃光16小时,黑8小时培养25-35天后,茎段潜伏芽发育生长出新枝条至2-4cm长;所述的诱导培养基由以下组分构成:WPM基本培养基 + ZT 3.0-4.0 mg/L + NAA0.2-0.4 mg/L + 20 g/L 蔗糖或白糖 + 6-10 g/L 琼脂,pH4.8-5.2,高温灭菌;
4)增殖培养:剪取新长出的枝条,去顶芽后插入增殖培养基中,于23-26℃光16小时,黑8小时,培养45-60天后,茎段长出丛生芽;此阶段可重复进行;所述的增殖培养基由以下组分构成: WPM基本培养基 + ZT 1.0-2.0 mg/L + NAA 0.1-0.2 mg/L + 20g/L 蔗糖或白糖 + 6-10 g/L 琼脂,pH 4.8-5.2,高温灭菌;
5)壮苗培养:将长到1-2cm长的丛生芽剪切移入壮苗培养基中,于23-26℃光16小时/黑8小时,培养25-35天,待长到3-5cm后移入基质中,进行瓶外生根;所述的壮苗培养基由以下组分构成:WPM基本培养基 + ZT 0.5-1.0 mg/L + NAA0.05-0.1 mg/L + 20g/L 蔗糖或白糖 + 6-10 g/L 琼脂,pH 4.8-5.2,高温灭菌;
6)瓶外生根:在每年10至次年3月,将长到3-5 cm高的瓶苗在室外放置1周,洗去枝条上的琼脂后移入含有含泥炭:珍珠岩:蛭石体积比2:1:1的基质中,在保湿保温条件下生长,1-2个月后生根。
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