[发明专利]湿法球磨联合酶法提取黑豆多肽的方法无效
申请号: | 201310333490.2 | 申请日: | 2013-08-02 |
公开(公告)号: | CN103392904A | 公开(公告)日: | 2013-11-20 |
发明(设计)人: | 庄义庆;吴琴燕;杨敬辉 | 申请(专利权)人: | 江苏丘陵地区镇江农业科学研究所 |
主分类号: | A23J1/14 | 分类号: | A23J1/14;A23J3/14;A23J3/34;A23J3/22 |
代理公司: | 江苏致邦律师事务所 32230 | 代理人: | 徐蓓 |
地址: | 212400 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 湿法 联合 提取 黑豆 多肽 方法 | ||
1.一种湿法球磨联合酶法提取黑豆多肽的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)球磨粉碎:取100-200g的脱脂黑豆豆粕粉至于玛瑙罐中,加入物料重量3-5倍的水,并加酶20-40U/g,采用行星式球磨机在转速为250-400rpm条件下对黑豆豆粕粉进行湿法粉碎1-3h得到超细粉体悬浊液;
(2)酶水解:将悬浊液与球罐分离,取2-3倍的水冲洗球罐,合并2次悬浊液;向溶液中补充水量至干物浓度为50-100g/l,利用质量比为2%的氢氧化钠和体积比为1%的盐酸,调整pH至6.0,继续加入15-30U/g的木瓜蛋白酶;
(3)离心分离:在60℃条件下酶解10-60min后离心得上清液即多肽溶液。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,还包括对所述多肽溶液脱色提纯的步骤:在粗制的多肽溶液中加入黑豆豆粕粉重量1.5-2.5%的活性炭,在55-60℃下搅拌反应60min,15000rpm离心20min,上清液为脱水多肽溶液;将脱色后的多肽溶液利用Sephadex G15凝胶柱分离脱盐,分离条件为:上样量5ml,洗脱液为蒸馏水,流速为2.0ml/min,收集洗脱时间40min-60min内组分,浓缩、冷冻干燥,得到活性多肽。
3.根据权利要求1所述的一种湿法球磨联合酶法提取黑豆多肽的方法,其特征在于,步骤(1)中加酶为纤维素酶和木瓜蛋白酶,纤维素酶用量为5-10u/g,木瓜蛋白酶用量为15-30u/g。
4.根据权利要求1所述的一种湿法球磨联合酶法提取黑豆多肽的方法,其特征在于,步骤(3)中所述离心的转速为5000-10000rpm,时间10-30min。
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