[发明专利]一种测定替勃龙片剂中抗氧剂含量的方法

说明书

技术领域

本发明涉及替勃龙片剂杂质控制的方法，具体的涉及一种测定替勃龙片剂中6-棕榈酰-L-抗坏血酸含量的方法。

背景技术

替勃龙(tibolone)是一种人工合成的甾体激素类药物，化学名称为17-羟基-7α-甲基-19-去甲基-17α-孕甾-5(10)-烯-20-炔-3-酮。该药物临床上广泛应用于防治心脑血管疾病、骨质疏松，缓解绝经期抑郁症状，调解脂代谢，治疗更年期或绝经期妇女机能紊乱等，是目前较为理想的绝经期妇女激素替代治疗药物。

替勃龙易被氧化而产生与氧化有关的杂质，传统的制剂制备工艺中使用维生素E作为抗氧剂，维生素E为油状，制备中需要加热溶解，导致抗氧作用大大降低；制剂研究过程中发现，加入6-棕榈酰-L-抗坏血酸对于药物活性成分具有更好的稳定作用。该抗氧剂成分的化学名称为(S)-2-[(R)-3，4-二羟基-5-氧代-2，5-二氢-2-呋喃基]-2-羟乙基十六酸酯，化学结构式为：

6-棕榈酰-L-抗坏血酸的加入能有效降低替勃龙片中与氧化有关的杂质含量，当6-棕榈酰-L-抗坏血酸的含量降低时，其抗氧化作用减弱，与氧化有关的杂质会相应增加，影响药品的安全性和有效性；而作为药品的一种辅料，抗氧剂的含量也需要明确和控制，加之6-棕榈酰-L-抗坏血酸本身也易被氧化发生降解从而影响其含量，因此需要通过测定6-棕榈酰-L-抗坏血酸的含量对替勃龙片剂的质量进行控制。

目前已有的替勃龙片剂质量标准中尚无检测抗氧剂6-棕榈酰-L-抗坏血酸含量的规定。测定6-棕榈酰-L-抗坏血酸原料常用的碘滴定法由于干扰问题不适合用于替勃龙片剂中该成分的含量测定。

为提高替勃龙片剂的质量，解决替勃龙片剂中的氧化杂质控制有关的问题，有必要提出一种替勃龙片剂中6-棕榈酰-L-抗坏血酸抗氧剂含量的测定方法，可以在产品的质量研究和稳定性研究中对该抗氧剂含量进行测定。

发明内容

本发明的目的之一在于提供一种测定替勃龙片剂中6-棕榈酰-L-抗坏血酸含量的方法。

本发明的目的之二在于提供一种替勃龙片剂的氧化杂质控制方法。

本发明的技术方案是：

利用高效液相色谱法，以6-棕榈酰-L-抗坏血酸为对照品，以异抗坏血酸为稳定剂，对作为供试品的所述替勃龙片剂中6-棕榈酰-L-抗坏血酸的含量进行测定，由外标法计算得到替勃龙片剂中6-棕榈酰-L-抗坏血酸的含量。

本方法所用的流动相包括无机相A和有机相B，其中A为磷酸-水体系，B为乙腈-甲醇体系。

本方法所用的流动相中A与B的体积比V_A/V_B＝15/85～5/95，优选5/95；磷酸-水的体积比V_磷酸/V_水＝1/99；乙腈-甲醇的体积比V_乙腈/V_甲醇＝45/55～55/45，优选50/50。流动相流速为0.8mL/min1mL/min，优选1mL/min。色谱柱为C18反相色谱柱，色谱柱可以采用250×1.6mm5μm或150×4.6mm5μm的规格，例如Inertsil ODS-3 250×1.6mm 5μm，Diamonsil C18150×4.6mm 5μm或Agilent C18 150×4.6mm 5μm。柱温设定为25～35℃，优选柱温为30℃。紫外检测器检测波长为243nm。

本方法中还包括如下溶液的配制：

I.提取溶剂的配制

取异抗坏血酸适量置于容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，制备成异抗坏血酸甲醇溶液，优选配制成质量浓度为1mg/mL的异抗坏血酸甲醇溶液。

II.供试品溶液的配制

取替勃龙片适量置于容量瓶中，加入少量水，振摇，使药片崩解后，加入适量提取溶剂，超声后放至室温，加入提取溶剂定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液制备成供试品溶液，优选制备成质量浓度为0.02mg/mL的供试品溶液。

III.对照品溶液的配制

取6-棕榈酰-L-抗坏血酸对照品适量，置于容量瓶中，加入适量提取溶剂，超声后放至室温，加入提取溶剂定容至刻度，摇匀，制备成对照品溶液，优选制备成质量浓度为0.02mg/mL的对照品溶液。

本方法还包括如下计算含量的步骤：

分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算含量即得。