[发明专利]一种HPLC法测定瑞舒伐他汀钙的含量及其有关物质的方法

说明书

技术领域

本发明属于医药领域，具体涉及一种HPLC法测定瑞舒伐他汀钙的含量及其有关物质的方法。

背景技术

瑞舒伐他汀是一种选择性HMG-CoA还原酶抑制剂，具有调节血脂的作用。通常以其钙盐形式存在，分子式为C₄₄H₅₄CaF₂N₆O₁₂S₂，化学名为双-(E)-7-[4-(4-氟基苯基)-6-异丙基-2-[甲基(甲磺酰基)氨基]-嘧啶-5-基](3R，5S)-3，5-羟基-6-庚烯酸]钙盐。阿斯利康公司2012年瑞舒伐他汀钙的销售额高达62.53亿美元，此药物具有良好的市场和应用前景。

瑞舒伐他汀钙具有2个手性中心，性质不稳定，易发生降解等，因此必须建立对其含量和有关物质的测定方法，以确保最终产品的质量控制。目前大部分检测方法都局限于检测其中一种或几种降解产物，例如专利一种HPLC法测定瑞舒伐他汀钙的光学异构体的方法(CN101532990A)采用特定的手性柱检测瑞舒伐他汀钙光学异构体，手性柱的成本一般都高于普通的C18柱；进口注册标准仅对氧化降解产物、光降解产物及内酯化降解产物进行检测，所检测的降解杂质种类尚不全面。Trivedi HK(Development and Validation of a stability-indicating RP-UPLC Method for Determination of Rosuvastatin and Related Substance in Pharmaceutical Dosage Form.Sci Pharm.2012Jun；80(2)：393-406.)采用超高压液相检测瑞舒伐他汀钙的降解产物，一方面其方法对仪器设备和色谱柱的要求较高，难以普及，另一方面梯度洗脱方法较等度洗脱复杂。因此，目前可用的分析方法中，没有一个方法被报道出，采用HPLC法在色谱洗脱时间内，可以同时分离和量化瑞舒伐他汀钙所有已知的降解产物。

发明内容

本发明一种HPLC法测定瑞舒伐他汀钙的含量及其有关物质的方法，此方法能够同时测定瑞舒伐他汀钙中的5种有关物质，5种有关物质分别为瑞舒伐他汀钙光学异构体峰、瑞舒伐他汀钙氧化降解产物ZD4522B2、瑞舒伐他汀钙内酯化降解产物ZD4522(3R，5S)、瑞舒伐他汀钙光降解产物ZD4522PDP1(简称：光降解产物1)、瑞舒伐他汀钙光降解产物ZD4522PDP2(简称：光降解产物2)。

本发明一种HPLC法测定瑞舒伐他汀钙的含量及其有关物质的方法，此方法包括以下几个步骤：

①对照品溶液的制备

精密称取瑞舒伐他汀钙对照品25mg，置50ml容量瓶中，加水30ml，超声使溶解，加水稀释至刻度，摇匀，即得瑞舒伐他汀钙对照品溶液；

②降解产物的制备：

按照进口注册标准中瑞舒伐他汀钙片标准项下分别制备瑞舒伐他汀钙光降解产物ZD4522PDP1储备液、瑞舒伐他汀钙光降解产物ZD4522PDP2储备液、瑞舒伐他汀钙内酯化降解产物ZD4522(3R，5S)储备液、瑞舒伐他汀钙氧化降解产物ZD4522B2；

取瑞舒伐他汀钙对照品20mg，置200ml量瓶中，加水100ml振摇使溶解，加1M盐酸20ml，混匀，置60℃水浴加热2小时，加1M氢氧化钠溶液20ml，混匀，冷却至室温，加乙腈50ml，用水稀释至刻度，摇匀，作为光学异构体产物储备液；

③降解产物溶液的制备：

光降解产物溶液：精密量取光降解产物储备液2ml，加乙腈11ml，超声使溶解，用水稀释至刻度，摇匀，即得；

内酯化降解产物溶液：精密量取内酯化降解产物储备液5ml，加乙腈11ml，超声使溶解，用水稀释至刻度，摇匀，即得；

氧化降解产物品溶液：取氧化降解产物对照品50mg，置50ml容量瓶中，加乙腈11ml，超声使溶解，用水稀释至刻度，摇匀，即得；

光学异构体产物溶液：精密量取光学异构体产物储备液2ml，加乙腈11ml，超声使溶解，用水稀释至刻度，摇匀，即得；

降解产物混合溶液的制备：取氧化降解产物对照品50mg，置50mi容量瓶中，加乙腈11ml，超声使溶解，加光降解产物储备液2ml，内酯化降解产物储备液5ml，光学异构体产物储备液2mi，用水稀释至刻度，摇匀，即得；

④供试品溶液的制备