[发明专利]一种基于白蛋白假酯酶水解反应的特异性荧光探针及应用有效
申请号: | 201310338267.7 | 申请日: | 2013-08-06 |
公开(公告)号: | CN104341346B | 公开(公告)日: | 2017-08-29 |
发明(设计)人: | 杨凌;崔京南;葛广波;刘兆明;冯磊 | 申请(专利权)人: | 中国科学院大连化学物理研究所 |
主分类号: | C07D221/14 | 分类号: | C07D221/14;C09K11/06;G01N21/64 |
代理公司: | 沈阳晨创科技专利代理有限责任公司21001 | 代理人: | 张晨 |
地址: | 116023 *** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 白蛋白 假酯酶 水解 反应 特异性 荧光 探针 应用 | ||
1.一种基于白蛋白假酯酶水解反应的特异性荧光探针,其特征在于:该特异性荧光探针的酯键可被人血清白蛋白特异性水解为与分子荧光发射波谱显著不同的荧光产物,借助体系中产物的含量来确定白蛋白的含量及功能;
该特异性荧光探针为N-正丁基-4-羟基-1,8-萘酰亚胺母体C-4位羟基被取代的联苯甲酰酯类衍生物,其结构式如式(1)A、B、C、D所示,
2.一种权利要求1所述特异性荧光探针在定量测定不同样本中人血清白蛋白含量的应用,其特征在于:采用上述式(1)化合物作为白蛋白特异性的水解代谢底物,进行水解反应,通过定量检测单位时间内底物的消除量以及水解产物的生成量来测定不同样本中白蛋白的含量。
3.按照权利要求2所述特异性荧光探针在定量测定不同样本中人血清白蛋白含量的应用,其特征在于:所述样本为重组表达的白蛋白单酶、人组织制备液或各类组织细胞。
4.按照权利要求2所述特异性荧光探针在定量测定不同样本中人血清白蛋白含量的应用,其特征在于:所述水解反应条件为:体系为磷酸缓冲液;探针底物的浓度介于1/10-10Km之间;孵育体系pH值介于5.5-10.5之间;反应温度介于20-60℃之间。
5.按照权利要求2所述特异性荧光探针在定量测定不同样本中人血清白蛋白含量的应用,其特征在于:探针底物及其水解产物均具有荧光属性,采用荧光检测器实现底物及产物的快速灵敏检测;荧光检测条件为:激发波长300-500nm,发射波长410-600nm。
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