[发明专利]饲料中聚醚类抗生素的检测方法

权利要求书

1.一种饲料中聚醚类抗生素的检测方法，其特征在于，通过混合酸性流动相同时使拉沙洛菌素、莫能菌素、盐霉素和甲基盐霉素在色谱分离柱上分离；具体检测步骤如下：

1）向2g粉末状饲料样品中加入10ml体积比为10%的甲醇溶液，于涡旋混合器上震荡5min，静置10min后以5200r/min转速离心10min，取上清液，重复上述提取步骤一次；将两次所得上清液用氮气吹干得残渣，用1ml体积比为9:1的甲醇与水的混合液溶解所述残渣后过0.22μm微孔滤膜，得到样品滤液；

2）混合酸性流动相经脱气机去除空气后通过液相泵经安全开关流入高效液相色谱仪，流速为0.7ml/min，柱温40℃，通过加样器加入步骤1所述样品滤液10μl；

3）对步骤2中经色谱柱分离后的物质进行荧光检测，设定荧光检测器激发波长为310nm，发射波长为420nm，获得拉沙洛菌素的检测结果；

4）将步骤3中经荧光检测后的混合液通过反流保护器导入体积为0.1ml的反应器A中；

5）在反应器A中，通过衍生泵A以0.3ml/min的速度向步骤3所述混合液中加入衍生试剂A，反应温度为室温，所述衍生剂A为浓硫酸与甲醇按体积比4：96混合所得；

6）在体积为1.4 ml的反应器B中通过衍生泵B以0.3ml/min的速度向步骤5所述混合液中加入衍生剂B，反应温度为90℃，所述衍生剂B为香兰醛与甲醇按重量/体积比6:95混合所得；

7）将紫外检测器波长设为520nm，对步骤6所述反应后溶液进行检测，获得莫能菌素、盐霉素和甲基盐霉素检测结果，检测后的混合液经背压调节器，流入废弃液收集瓶。

2.根据权利要求1所述的一种聚醚类抗生素检测方法，其特征在于所述混合酸性流动相为甲醇与5%的乙酸以体积比为9:1混合所得。

3.根据权利要求1所述的一种聚醚类抗生素检测方法，其特征在于：步骤2采用的色谱分离柱为Z0RBAX SB-C18型填充柱。

4.根据权利要求1-3所述一种聚醚类抗生素检测方法，其特征在于所述安全开关设置在510psi时开启。

5.根据权利要求4所述一种聚醚类抗生素检测方法，其特征在于所述背压调节器设定为100psi。