[发明专利]利用特征十二多肽制备家蚕丝素蛋白特异抗体的方法有效

专利信息
申请号: 201310342863.2 申请日: 2013-08-07
公开(公告)号: CN103509108A 公开(公告)日: 2014-01-15
发明(设计)人: 郑秦;沈运旺;吴小锋;郑海玲;周旸 申请(专利权)人: 浙江大学;中国丝绸博物馆
主分类号: C07K16/18 分类号: C07K16/18;C07K16/06
代理公司: 杭州求是专利事务所有限公司 33200 代理人: 陈昱彤
地址: 310058 浙江*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 利用 特征 十二 多肽 制备 家蚕 丝素 蛋白 特异 抗体 方法
【权利要求书】:

1.利用特征十二多肽制备家蚕丝素蛋白特异抗体的方法,包括以下步骤:

    步骤一:合成序列为“CGYGAGAGAGYGA” 的多肽,将该多肽和匙孔血蓝蛋白偶联起来得到完全抗原;

步骤二:用生理盐水稀释所述完全抗原,将稀释后的完全抗原与完全弗氏佐剂混合,然后进行乳化处理得到初次免疫抗原乳化液;使用初次免疫抗原乳化液对兔子进行初次免疫,然后对兔子进行加强免疫,加强免疫使用的是加强免疫抗原乳化液;所述加强免疫抗原乳化液是由所述稀释后的完全抗原与不完全弗氏佐剂混合,然后进行乳化处理得到;当兔子的抗血清效价达到1/10000时,收集免疫后的兔子的血液,并使血块充分收缩及抗血清完全析出,收集抗血清并离心处理得到上清液。

2.根据权利要求1或2所述的方法,其特征是:在所述步骤二中,在配制初次免疫抗原乳化液时,稀释后的完全抗原与完全弗氏佐剂是按体积比1:1进行混合;在配制加强免疫抗原乳化液时,稀释后的完全抗原与不完全弗氏佐剂是按体积比1:1进行混合。

3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征是:在所述步骤二中,对兔子进行初次免疫的方法是:使用初次免疫抗原乳化液对兔子的后大腿和皮下进行多点注射,每只注射100ul;

对兔子进行加强免疫的方法是:在初次免疫后的第2、4、6周分别进行一次加强免疫,每次加强免疫是使用加强免疫抗原乳化液对兔子的后大腿和皮下进行多点注射,每只注射100ul。

4.根据权利要求1或2所述的方法,其特征是:在所述步骤二中,使血块充分收缩及抗血清完全析出的方法是:将所收集的血液置室温下让其凝固,然后将凝固血液置于37℃温箱内放置30 min,再置于4℃冰箱过夜。

5. 根据权利要求3所述的方法,其特征是:在所述步骤二中,使血块充分收缩及抗血清完全析出的方法是:将所收集的血液置室温下让其凝固,然后将凝固血液置于37℃温箱内放置30 min,再置于4℃冰箱过夜。

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