[发明专利]一种人血白蛋白的制备工艺

权利要求书

1.一种人血白蛋白的制备工艺，采用低温乙醇分离法，以人血浆为原料，分别进行血浆溶解；组分I制作；组分II+III制作；组分IV制作；组分V制作；组分V精制；超滤；稀配；巴氏灭活；蛋白除菌分装；制品孵育；成品包装；其特征在于： 所述组分II+III制作、组分IV制作、组分V制作和组分V精制中采用压滤技术替代传统的离心技术进行固液分离，控制进液压力最高不超过0.20Mpa；白蛋白收率>29g/L血浆，纯度>98%。

2. 根据权利要求1所述的一种人血白蛋白的制备工艺，其特征在于：所述组分V精制中采用Zetaplus深层滤芯过滤，提高对内毒素和病毒的脱除能力，吸附制品中带负电的凝血因子XIIa，降低人血白蛋白制品中的激肽释放酶原激活剂PKA含量。

3.根据权利要求1或2所述的一种人血白蛋白的制备工艺，其特征在于：所述超滤中采用超滤技术将组分V纯化液浓缩至蛋白含量为15%以上，通过使用2种梯度浓度的氯化钠溶液超滤，控制制品中的乙醇残留量≤0.025%，铝残留量<50μg/L。

4.根据权利要求1或2所述的一种人血白蛋白的制备工艺，其特征在于：所述组分II+III制作：取组分I 上清液，加pH4.0缓冲液调节组分I上清液的pH值为6.80—6.85，控制流速不超过1.0升/分钟；添加低于－15℃的95％乙醇至乙醇体积比浓度为20％，流速为1.0—1.2升/分钟，温度控制在－4—－6℃；加完乙醇后，pH为6.80—7.00；搅拌120分钟以上后，静置60分钟以上，再开启搅拌，按每升反应液加入17—19g硅藻土，进行压滤，进液压力最高不超过0.20Mpa，压滤后得组分Ⅱ+Ⅲ沉淀和组分Ⅱ+Ⅲ上清液；组分Ⅱ+Ⅲ沉淀用于制备免疫球蛋白，组分Ⅱ+Ⅲ上清液进入下一步工序。

5.根据权利要求1或2所述的一种人血白蛋白的制备工艺，其特征在于：所述组分IV制作：取组分Ⅱ+Ⅲ上清液，加pH4.0缓冲液调节组分Ⅱ+Ⅲ上清液的pH值为5.70—5.90，控制流速不超过1.0升/分钟，温度控制在－4—－6℃；添加低于－15℃的95％乙醇至乙醇体积比浓度为40％，流速为1.0—1.2升/分钟；加完乙醇后，pH为5.90—6.10；搅拌120分钟以上后，静置60分钟以上，再开启搅拌，按每升反应液加入14—16g硅藻土，进行压滤，进液压力最高不超过0.20Mpa，压滤后得组分IV沉淀和组分IV上清液；组分IV沉淀废弃，组分IV上清液进入下一步工序。

6.根据权利要求1或2所述的一种人血白蛋白的制备工艺，其特征在于：所述组分V制作：取组分IV上清液，加pH4.0缓冲液调节组分IV上清液的pH值为4.80—5.00，控制流速不超过1.0升/分钟，温度控制在－8℃以下，搅拌120分钟以上后，再按每升反应液加入3.5—4.5g硅藻土，进行压滤，进液压力最高不超过0.20Mpa，压滤后得组分V沉淀和组分V上清液；组分V上清液转移至酒精回收塔回收酒精，组分V沉淀进入下一步工序。

7.根据权利要求1或2所述的一种人血白蛋白的制备工艺，其特征在于：所述组分V精制：取组分V沉淀用4.8—5.2倍注射用水充分溶解，加pH4.0缓冲液调节组分V沉淀溶解液的pH值为4.50—4.60，控制流速不超过1.0升/分钟；添加低于－15℃的25％乙醇至乙醇体积比浓度为10％，流速为1.0—1.2升/分钟，温度控制在－2—－3℃；搅拌120分钟以上后，再按每升反应液加入18—22g硅藻土，进行压滤，进液压力最高不超过0.20Mpa；滤液用Zetaplus深层滤芯过滤，得到组分V纯化液，过滤过程中，进液压力最高不超过0.20Mpa。

8.根据权利要求3所述的一种人血白蛋白的制备工艺，其特征在于：所述超滤：超滤过程中控制进液压不大于0.45Mpa，回流压不大于0.30Mpa，进液压与回流压压差大于0.10Mpa；将组分V纯化液浓缩至蛋白含量为15%以上，浓缩结束后，依次用4倍体积的2—8℃的0.85%氯化钠溶液和5倍体积的2—8℃的0.5%氯化钠溶液进行等体积透析；透析结束后，将蛋白浓度浓缩至20%以上；使用1mol/L NaHCO₃调节蛋白液的pH值至6.90—7.10。