[发明专利]一种灵菌红素提取纯化的方法

权利要求书

1.一种提取纯化灵菌红素的方法，用于从生产灵菌红素的固态发酵物料中分离并纯化出灵菌红素，其特征在于，具有以下步骤：

将所述固态发酵物料进行真空干燥制得提取原料；

以一定重量比将提取溶剂与所述提取原料在容器中混合，保持温度在40℃-50℃之间，浸提1-2小时，移出并过滤所述容器中的液体得到第一提取液，于50℃-70℃减压浓缩至无液体挥发，得到第一浓缩液；

以一定重量比将含水溶剂加入所述容器，保持温度在40℃-50℃之间，浸提1-2小时，移出并过滤所述容器中的液体得到第二提取液，于50℃-70℃减压浓缩至无液体挥发，得到第二浓缩液；

合并所述第一浓缩液和所述第二浓缩液，并于45℃-60℃减压浓缩至无液体挥发，制备得到灵菌红素浓缩液；

将所述灵菌红素浓缩液离心，分别收集上清液和沉淀；

向所述上清液中加入与所述上清液等体积的乙酸乙酯进行萃取，收集乙酸乙酯相，60℃下减压浓缩，蒸干溶剂得到灵菌红素粗提物；

将所述灵菌红素粗提物与所述沉淀合并，加入0.5～2倍质量的硅胶，充分搅拌后干燥，制备得到灵菌红素干浓缩物；

将所述灵菌红素干浓缩物加入硅胶轴向压缩柱，以体积比1:1～1:4的正己烷-乙酸乙酯混合液和纯乙酸乙酯梯度洗脱，收集并合并红色洗脱组分，减压浓缩蒸干溶剂得到灵菌红素次纯品；

将所述灵菌红素次纯品与0.5～2倍质量的硅胶混合，继续用所述硅胶轴向压缩柱纯化，以体积比1:3～1:5的正己烷-乙酸乙酯混合液和纯乙酸乙酯进行梯度洗脱，按时间分批收集洗脱组分，利用高效液相色谱检测各批所述洗脱组分，并将纯度高的所述洗脱组分合并，减压浓缩除去溶剂得到灵菌红素高纯品。

2.根据权利要求1所述的提取纯化灵菌红素的方法，其特征在于：

所述溶剂为低级醇、丙酮、乙腈及其含水溶剂中的一种；

所述含水溶剂为含水10-30%的低级醇、丙酮以及乙腈溶液，

其中所述低级醇为甲醇、乙醇以及异丙醇中的一种。

3.根据权利要求1所述的提取纯化灵菌红素的方法，其特征在于：

其中，所述容器为杭州惠合机械设备有限公司生产的多功能提取罐。

4.根据权利要求1所述的提取纯化灵菌红素的方法，其特征在于：

其中，在减压浓缩制备所述第一浓缩液和所述第二浓缩液时，回收挥发出来的溶剂。

5.根据权利要求1所述的提取纯化灵菌红素的方法，其特征在于：

其中，制备所述灵菌红素干浓缩物时使用的干燥技术为冷冻干燥、50℃真空干燥以及50℃烘干中的任意一种。

6.根据权利要求1所述的提取纯化灵菌红素的方法，其特征在于：

其中，当梯度洗脱时，洗脱液流速为250-330ml/min，每个梯度的洗脱液的量为40-60L。