[发明专利]用于汉滩病毒感染后快速检测与鉴定的SYBR GreenⅠReal-time PCR方法有效
| 申请号： | 201310357737.4 | 申请日： | 2013-08-16 |
| 公开（公告）号： | CN103436637A | 公开（公告）日： | 2013-12-11 |
| 发明（设计）人： | 吴兴安;刘梓谕;王芳;张晓晓;张芳琳;程林峰;袁利娟;徐志凯 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军第四军医大学 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68;G01N21/64 |
| 代理公司： | 西安吉盛专利代理有限责任公司 61108 | 代理人： | 邱志贤 |
| 地址： | 710032 陕西省西安*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 病毒感染 快速 检测 鉴定 sybr green real time pcr 方法 | ||
1.用于汉滩病毒感染后快速检测与鉴定的SYBR GreenⅠReal-time PCR方法，其特征是：根据汉滩病毒76-118株S基因保守区序列，设计一对汉滩病毒核酸的实时荧光定量PCR引物，扩增汉滩病毒核酸，准确定量样本中的病毒载量拷贝数。
2.根据权利要求１所述的用于汉滩病毒感染后快速检测与鉴定的SYBR GreenⅠReal-time PCR方法，其特征是：所述的一对汉滩病毒核酸的实时荧光定量PCR引物序列如下：
No1：上游引物HTNV-F-13：GAG CCT GGA GAC CAT CTG
No2：下游引物HTNV-R-13：CGG GAC GAC AAA GGA TGT 。
3.根据权利要求１所述的用于汉滩病毒感染后快速检测与鉴定的SYBR GreenⅠReal-time PCR方法，其特征是：所述的准确定量样本中的病毒载量拷贝数，即汉滩病毒定量检测标准品是：用含汉滩病毒标准株76-118 全长S基因片段的pMD18-T 载体，构建阳性标准品质粒；提取质粒紫外分光光度计测定浓度，根据公式：6.02 ×1023 拷贝数/摩尔(copies /moL）×浓度（g/μl）/平均分子量（MW g/moL）= copies/μl 计算其拷贝数。
4.根据权利要求１所述的用于汉滩病毒感染后快速检测与鉴定的SYBR GreenⅠReal-time PCR方法，其特征是：所述的SYBR GreenⅠReal-time PCR方法用于对感染Vero E6细胞、感染实验小鼠和临床患者三种不同样本中的汉滩病毒核酸进行定量检测。
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