[发明专利]一种海洋生物脂肪酶的制备方法无效
| 申请号： | 201310359146.0 | 申请日： | 2013-08-19 |
| 公开（公告）号： | CN103397008A | 公开（公告）日： | 2013-11-20 |
| 发明（设计）人： | 宋良江;李文强;李建林;张欢;张建国 | 申请（专利权）人： | 山东金利丰生物科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/20 | 分类号： | C12N9/20 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 262706 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 海洋生物 脂肪酶 制备 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种海洋生物脂肪酶的制备方法，其特征在于：所述制备方法的具体步骤如下：
A、低温碱性脂肪酶的适冷性海洋酵母菌种的选取：
从黄海海泥中筛选到的一株能够分泌低温碱性脂肪酶的适冷性海洋酵母菌株；
B、将上述低温碱性脂肪酶的适冷性海洋酵母菌种接种于种子培养基中，200rpm培养20h，再接种于灭菌的发酵培养基中，接种量5％-8％，发酵温度28℃-30℃；
所述的发酵培养基包含：酵母粉5％、鱼蛋白胨1％、0.5％的橄榄油、0.2％磷酸二氢钾、磷酸氢二钾0.1％、0.05％硫酸镁，用25％氨水调节至PH5-6；
C、发酵培养基中使用橄榄油，待橄榄油耗尽，补加0.5％的橄榄油；
D、待橄榄油耗尽，流加12ml/L的甲醇，控制培养温度为25℃，流加量1-6h为1ml/L.h，6h后增加至2ml/L.h，25％工业氨水调节pH6，诱导培养80h；
上述工艺中保持：通气量1∶0.8-1∶1.6；罐压1kg/平方厘米；补料生长液15ml/L的橄榄油；诱导液12ml/L的甲醇；搅拌转速不低于200rpm/min；发酵时间：96h。
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