[发明专利]一种具有抗氧化活性的短梗五加浆果花色苷的制备方法

说明书

技术领域　

本发明涉及一种从植物浆果中提取花色苷的方法，具体是一种具有抗氧化活性的短梗五加浆果花色苷的制备方法。 

背景技术

在现有技术中，研究发现长期食用合成色素危害人体健康，一些国家已开始立法限制或禁止使用合成色素。与此同时，人们认识到从天然植物中提取色素不仅无毒、无害，而且还有一定的营养保健作用。因此，开发利用天然色素代替合成色素已经成为食品行业的发展趋势。

花色苷广泛存在于植物的花、果实、茎、叶和根器官的细胞液中，是一种天然的水溶性色素，属黄酮多酚类化合物。花色苷具有抗氧化、抗肿瘤、抗癌、抗炎、预防糖尿病、减肥、保护视力等功效。作为一种天然色素，花色苷安全、无毒，且对人体具有许多保健功能，在食品、保健品、化妆品和医药等行业都有广阔的应用前景。

短梗五加为五加科五加属植物，别名五加参、刺拐棒，主要分布在东北地区及河北、山西、河南等地。其作用特点与人参基本相同，具有免疫调节、抗肿瘤、抗衰老、抗辐射、抗损伤及抗疲劳等多种保健功效，深受广大消费者的的青睐。短梗五加果实为浆果状核果，果肉饱满，呈球形或卵形，9-10月成熟，成熟后由绿色变为紫黑色。短梗五加浆果含有Fe、Se、Cu、Mn等多种必需微量元素和人体全部必需氨基酸，是民间食疗的理想资源。

目前，花色苷的提取方法主要有溶剂萃取法、超临界流体萃取法、超声波辅助提取法、微波辅助提取法和酶法等。其中，溶剂萃取法是最常用提取方法，但存在温度高、耗时长、能耗大、有机溶剂残留大等缺点，易造成提取物结构和性质的改变。超临界流体萃取法特别适合脂溶性成分，对水溶性的花色苷萃取效果不佳，且一次性投资过大，提取天然花色苷的工艺尚不成熟而未被广泛应用。单一借助于超声波、微波、酶法辅助提取花色苷，存在能耗大、提取率低、温度高等缺点。如张名位等（专利号200510036419.3）对黑大豆种皮花色苷的制备进行了研究，采用微波频率2450MHz、微波功率12-20kw破碎种皮细胞，再采用乙醇提取，浸提时间1-2小时，浸提次数2-3次。此方法和本发明相比较存在功率高、能耗大、时间长等问题，且功率过高易使原料温度大幅度升高，造成提取物结构和性质的改变。

目前，有关冻结融解酶法和超声—微波协同提取短梗五加浆果花色苷的方法未见报道。

发明内容

本发明目的是针对上述不足而提供了一种冻结融解酶法和超声—微波协同提取短梗五加浆果花色苷的组合方法。该方法具有条件温和、目标专一、提取率高、时间短、能耗低、试剂用量少、有效成分性质稳定等优点，可大大地提高生产效率。同时，采用真空冷冻干燥技术，使产品具有较好的生物活性、色泽和溶解性，适合工业化生产。

本发明的技术解决方案是：一种具有抗氧化活性的短梗五加浆果花色苷的制备方法，其特征在于步骤如下：

（1）原料选择和预处理：以成熟的短梗五加鲜果为原料，洗净后冷冻。

（2）冻结融解酶法提取短梗五加浆果花色苷：取冻结的短梗五加浆果，加入液料比为8:1-15:1、pH4-5.5、体积分数40%-60%的乙醇溶液，解冻后用捣碎机破碎3-10min，再加入质量分数0.1%-1%的纤维素酶，在40℃-60℃的条件下酶解10min-30min。纤维素酶可使细胞间质与细胞壁中的纤维素类物质降解，使其结构疏松，有利于花色苷的溶出，提高提取率。通过酶解步骤，更有利于以下超声提取。在于步骤（2）中液料比优选为10:1-15:1。

（3）超声－微波协同提取短梗五加浆果花色苷：将上述酶解液用酸调pH2-3，在超声波功率50-100w、微波功率100-150w、40℃-60℃条件下，提取3-8min。将提取液在3000rpm-5000rpm下离心5-15min，收集上清液，得到短梗五加浆果花色苷粗提液。设备名称SL－SM50型超声微波组合反应系统：南京顺流仪器有限公司商售。

（4）短梗五加浆果花色苷粗提液纯化：将上述粗提液用AB-8大孔树脂进行吸附，静态吸附平衡时间为2h-5h，吸附流速1mL/min-2mL/min。解吸时间为1h-3h，用pH2-3、体积分数40%-60%乙醇洗脱大孔树脂上的花色苷，流速为1mL/min-2mL/min。收集洗脱液，30℃-60℃减压浓缩1-3h，得到紫黑色、粘稠的具有抗氧化活性花色苷浓缩液。