[发明专利]一种液固双相发酵生产绿色木霉的方法有效
申请号: | 201310372776.1 | 申请日: | 2013-08-23 |
公开(公告)号: | CN103409327A | 公开(公告)日: | 2013-11-27 |
发明(设计)人: | 黄俊生;梁昌聪;刘磊;张建华;郭立佳;王伟伟 | 申请(专利权)人: | 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12R1/885 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅 |
地址: | 571101 海南省海口市*** | 国省代码: | 海南;66 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 液固双相 发酵 生产 绿色 方法 | ||
1.一种培养绿色木霉的方法,包括如下步骤:
(1)将绿色木霉进行液体发酵,得到液体发酵产物;
(2)将液体发酵产物进行以膨胀蛭石为载体的固体发酵。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于:所述液体发酵的条件为:27-29℃,通入空气且通气量为9-11L/min,0.02-0.04Mpa。
3.如权利要求1或2所述的方法,其特征在于:所述液体发酵进行至发酵体系呈如下状态:有菌丝及液生孢子、无断裂的菌丝且菌丝体中无液泡。
4.如权利要求1或2所述的方法,其特征在于:所述液体发酵的时间为65小时-72小时。
5.如权利要求1至4中任一所述的方法,其特征在于:所述液体发酵是在液体发酵培养基中进行的;所述液体发酵培养基的制备方法如下:取蔗糖9-11g、玉米粉9-13g、NH4NO31.8-2.2g、大豆粕4-5.5g、MgSO4·7H2O0.8-1.2g和KH2PO42-4g,溶于水并用水定容至1000mL。
6.如权利要求1至5中任一所述的方法,其特征在于:所述固体发酵依次包括a阶段、b阶段和c阶段:
a阶段:在温度为23-25℃、湿度为93-97%的条件下培养;
b阶段:在温度为27-29℃、湿度为78-82%的条件下培养;
c阶段:在温度为25-27℃、湿度为38-42%的条件下培养。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于:所述a阶段中,培养时间为2-3天;所述b阶段中,培养时间为3天;所述c阶段中,培养时间为1天。
8.如权利要求1至7中任一所述的方法,其特征在于:所述固体发酵是在以膨胀蛭石为载体的固体发酵培养基中进行的;所述固体发酵培养基的制备方法如下:将300-400质量份膨胀蛭石、50-70质量份玉米粉、10-20质量份麸皮、0.8-1.2质量份KH2PO4、0.4-0.6质量份MgSO4和150-250份水混合均匀。
9.如权利要求8所述的方法,其特征在于:所述步骤(2)中,将18-22体积份所述步骤(1)得到的液体发酵产物接种至78-82体积份所述固体发酵培养基,即为所述固体发酵的初始时刻。
10.如权利要求1至9中任一所述的方法,其特征在于:所述绿色木霉为绿色木霉(Trichoderma viride)H06CGMCC No.6229。
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