[发明专利]一种用于养殖饲料发酵处理的复合微生态制剂

权利要求书

1.一种用于养殖饲料发酵处理的复合微生态制剂，其特征在于：其制备方法的具体步骤如下：

（1）原菌种斜面培养：将冷冻保藏管中的嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌、沼泽红假单胞菌、酿酒酵母分别在斜面中活化，之后分别置于90mm培养皿中进行纯化，得嗜酸乳杆菌斜面菌种、枯草芽孢杆菌斜面菌种、沼泽红假单胞菌斜面菌种、及酿酒酵母斜面菌种，备用；

（2）原菌种液体培养：将嗜酸乳杆菌斜面菌种接种于已灭菌的液体培养基Ⅰ中，之后置于37℃下厌氧培养1-2天得嗜酸乳杆菌原菌液；将枯草芽孢杆菌斜面菌种接种于已灭菌的液体培养基Ⅱ中，接着于30℃下好氧培养1-2天得枯草芽孢杆菌原菌液；将沼泽红假单胞菌斜面菌种接种于已灭菌的液体培养基Ⅲ中，接着于28℃-30℃厌氧钨丝灯光照培养5-7天得沼泽红假单胞菌斜面菌原菌液；将酿酒酵母斜面菌种接种于已灭菌的液体培养基Ⅳ中，之后于28℃-30℃下好氧培养3天得酿酒酵母原菌液；

（3）一级种子培养：将嗜酸乳杆菌原菌液、枯草芽孢杆菌原菌液、沼泽红假单胞菌原菌液、及酿酒酵母原菌液按1：1：1：1的菌量比接种于已灭菌的发酵培养基Ⅰ中进行培养，具体地：先接种枯草芽孢杆菌原菌液与酿酒酵母原菌液，并于30℃下好氧培养3天，再接种嗜酸乳杆菌原菌液与沼泽红假单胞菌原菌液，于37℃下厌氧培养3天，得复合微生态制剂的一级种子；

（4）二级种子培养：将所得的一级种子按5%的接种量接种于已灭菌的发酵培养基Ⅱ中，并于30℃下先好氧培养3-5天再厌氧培养3-5天，得复合微生态制剂的二级种子；

（5）成品培养：将所得的二级种子按5%的接种量接种至已灭菌的发酵培养基Ⅲ中，并于30℃下先好氧3-5天再厌氧培养3-5天，获得复合微生态制剂的成品。

2.根据权利要求1所述的一种用于养殖饲料发酵处理的复合微生态制剂，其特征在于：所述步骤（1）中嗜酸乳杆菌在斜面中活化的具体操作为：用接种环将嗜酸乳杆菌接种于已灭菌的斜面培养基Ⅰ上，之后于37℃下厌氧培养1-2天；所述斜面培养基Ⅰ的灭菌温度为121℃、灭菌时间为20min；且该斜面培养基Ⅰ的组分：蛋白胨10克、牛肉膏10克、酵母粉5克、葡萄糖5克、乙酸钠5克、柠檬酸二胺2克、吐温801克、磷酸氢二钾2克、硫酸镁0.2克、硫酸锰0.05克、碳酸钙20克、琼脂15克、水1000ml、PH6.8。

3.根据权利要求1所述的一种用于养殖饲料发酵处理的复合微生态制剂，其特征在于：所述步骤（1）中枯草芽孢杆菌在斜面中活化的具体操作为：用接种环将枯草芽孢杆菌接种于斜面培养基Ⅱ上，然后于30℃下好氧培养1-2天；所述斜面培养基Ⅱ的灭菌温度为121℃、灭菌时间为20min；且该斜面培养基Ⅱ的组分：蛋白胨30克、葡萄糖1克、牛肉膏5克、氯化钠5克、琼脂15克、水1000ml、PH7.2。

4.根据权利要求1所述的一种用于养殖饲料发酵处理的复合微生态制剂，其特征在于：所述步骤（1）中沼泽红假单胞菌在斜面中活化的具体操作为：用接种环将沼泽红假单胞菌接种于已灭菌的斜面培养基Ⅲ上，之后于28℃-30℃厌氧钨丝灯光照培养5-7天；所述斜面培养基Ⅲ的灭菌温度为121℃、灭菌时间为15min；且该斜面培养基Ⅲ的组分：酵母粉10克、磷酸氢二钾1克、硫酸镁0.5克、琼脂20克、水1000ml、PH7.0-7.2。

5.根据权利要求1所述的一种用于养殖饲料发酵处理的复合微生态制剂，其特征在于：所述步骤（1）中酿酒酵母在斜面中活化的具体操作为：用接种环将酿酒酵母接种于已灭菌的斜面培养基Ⅳ上，之后于28-30℃下好氧培养3天；所述斜面培养基Ⅳ的灭菌温度为121℃、灭菌时间为30min；且该斜面培养基Ⅳ的组分：马铃薯200克、蔗糖20克、琼脂15-20克、水1000ml、PH自然。

6.根据权利要求1所述的一种用于养殖饲料发酵处理的复合微生态制剂，其特征在于：所述步骤（2）中液体培养基Ⅰ的组分：蛋白胨10克、牛肉膏10克、酵母粉5克、葡萄糖5克、乙酸钠5克、柠檬酸二胺2克、吐温801克、磷酸氢二钾2克、硫酸镁0.2克、硫酸锰0.05克、碳酸钙20克、水1000ml、PH6.8；液体培养基Ⅱ的组分：蛋白胨30克、葡萄糖1克、牛肉膏5克、氯化钠5克、水1000ml、PH7.2；液体培养基Ⅲ的组分：酵母粉10克、磷酸氢二钾1克、硫酸镁0.5克、水1000ml、PH7.0-7.2；液体培养基Ⅳ的组分：马铃薯200克、蔗糖20克、水1000ml、PH自然。