[发明专利]一种用于养殖饲料发酵处理的复合微生态制剂

说明书

【技术领域】

本发明涉及一种养殖领域用的复合微生态制剂，尤其涉及一种用于养殖饲料发酵处理的复合微生态制剂。

【背景技术】

嗜酸乳杆菌属于乳杆菌属，革兰氏阳性杆菌，杆的末端呈圆形，主要存在小肠中，释放乳酸、乙酸和一些对有害菌起作用的抗菌素，调整肠道菌群平衡，抑制肠道不良微生物的增殖。

沼泽红假单胞菌属于光合细菌（英文缩写PSB）的一种，是地球上最古老的微生物之一。PSB菌体营养丰富，蛋白质含量高达65%，且富含多种生物活性物质，并具有适应性强，能耐受高浓度的有机废水和较强的分解转化能力，对酚、氰等毒物也有一定的耐受和分解能力等特点；其可用作饲料级微生物添加剂。

酿酒酵母，又称面包酵母或者出芽酵母；在现代分子和细胞生物学中用作真核模式生物，其作用相当于原核的模式生物大肠杆菌。酿酒酵母是发酵中最常用的生物种类。酿酒酵母的细胞为球形或者卵形，直径5-10μm。

枯草芽孢杆菌，是芽孢杆菌属的一种；单个细胞0.7～0.8×2～3微米，着色均匀；无荚膜，周生鞭毛，能运动；革兰氏阳性菌，芽孢0.6～0.9×1.0～1.5微米，椭圆到柱状，位于菌体中央或稍偏，芽孢形成后菌体不膨大；菌落表面粗糙不透明，污白色或微黄色，在液体培养基中生长时，常形成皱醭；需氧菌；其可利用蛋白质、多种糖及淀粉，分解色氨酸形成吲哚。其具有如下作用：枯草芽孢杆菌菌体生长过程中产生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性物质，这些活性物质对致病菌或内源性感染的条件致病菌有明显的抑制作用；枯草芽孢杆菌迅速消耗环境中的游离氧，造成肠道低氧，促进有益厌氧菌生长，并产生乳酸等有机酸类，降低肠道PH值，间接抑制其它致病菌生长；枯草芽孢杆菌菌体自身合成α-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶等酶类，在消化道中与动物体内的消化酶类一同发挥作用；能合成维生素B1、B2、B6、烟酸等多种B族维生素，提高动物体内干扰素和巨噬细胞的活性。

【发明内容】

本发明所要解决的技术问题在于提供一种用于养殖饲料发酵处理的复合微生态制剂。

本发明是通过以下技术方案解决上述技术问题的：一种用于养殖饲料发酵处理的复合微生态制剂，其制备方法的具体步骤如下：

（1）原菌种斜面培养：将冷冻保藏管中的嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌、沼泽红假单胞菌、酿酒酵母分别在斜面中活化，之后分别置于90mm培养皿中进行纯化，得嗜酸乳杆菌斜面菌种、枯草芽孢杆菌斜面菌种、沼泽红假单胞菌斜面菌种、及酿酒酵母斜面菌种，备用；

（2）原菌种液体培养：将嗜酸乳杆菌斜面菌种接种于已灭菌的液体培养基Ⅰ中，之后置于37℃下厌氧培养1-2天得嗜酸乳杆菌原菌液；将枯草芽孢杆菌斜面菌种接种于已灭菌的液体培养基Ⅱ中，接着于30℃下好氧培养1-2天得枯草芽孢杆菌原菌液；将沼泽红假单胞菌斜面菌种接种于已灭菌的液体培养基Ⅲ中，接着于28℃-30℃厌氧钨丝灯光照培养5-7天得沼泽红假单胞菌原菌液；将酿酒酵母斜面菌种接种于已灭菌的液体培养基Ⅳ中，之后于28℃-30℃下好氧培养3天得酿酒酵母原菌液；

（3）一级种子培养：将嗜酸乳杆菌原菌液、枯草芽孢杆菌原菌液、沼泽红假单胞菌原菌液、及酿酒酵母原菌液按1：1：1：1的菌量比接种于已灭菌的发酵培养基Ⅰ中进行培养，具体地：先接种枯草芽孢杆菌原菌液与酿酒酵母原菌液，并于30℃下好氧培养3天，再接种嗜酸乳杆菌原菌液与沼泽红假单胞菌原菌液，于37℃下厌氧培养3天，得复合微生态制剂的一级种子；

（4）二级种子培养：将所得的一级种子按5%的接种量接种于已灭菌的发酵培养基Ⅱ中，并于30℃下先好氧培养3-5天再厌氧培养3-5天，得复合微生态制剂的二级种子；

（5）成品培养：将所得的二级种子按5%的接种量接种至已灭菌的发酵培养基Ⅲ中，并于30℃下先好氧3-5天再厌氧培养3-5天，获得复合微生态制剂的成品。

进一步地，所述步骤（1）中嗜酸乳杆菌在斜面中活化的具体操作为：用接种环将嗜酸乳杆菌接种于已灭菌的斜面培养基Ⅰ上，之后于37℃下厌氧培养1-2天；所述斜面培养基Ⅰ的灭菌温度为121℃、灭菌时间为20min；且该斜面培养基Ⅰ的组分：蛋白胨10克、牛肉膏10克、酵母粉5克、葡萄糖5克、乙酸钠5克、柠檬酸二胺2克、吐温801克、磷酸氢二钾2克、硫酸镁0.2克、硫酸锰0.05克、碳酸钙20克、琼脂15克、水1000ml、PH6.8。