[发明专利]一种犊牛腹泻病中鉴定非典型性大肠杆菌的方法

说明书

技术领域

本发明属于犊牛腹泻病病因领域，尤其涉及一种犊牛腹泻病中鉴定非典型性大肠杆菌的方法。

背景技术

大肠埃希菌是一种重要的危害严重的肠道致病菌，它是一组革兰氏阴性菌，是人和动物肠道的正常菌群，多数不致病，且在肠道中合成B族维生素和维生素K而被动物利用。当宿主免疫力低下或大肠杆菌侵入肠外组织和器官时，可引起肠外感染。有少数菌株可直接引起肠道感染，这些大肠杆菌称为致病性大肠杆菌。

根据致病性大肠杆菌的致病特点分为5类：肠产毒性大肠杆菌ETEC，肠致病性大肠杆菌EPEC，肠侵袭性大肠杆菌EIEC，肠粘附性大肠杆菌EAEC和肠出血性大肠杆菌EHEC等。

肠产毒性大肠杆菌主要在小肠内繁殖，致病物质是不耐热肠毒素和耐热肠毒素两种毒素，这两种毒素可引起腹泻。肠致病性大肠杆菌在十二指肠、空肠和回肠上段大量繁殖，一般不产生肠毒素，可引起水样腹泻，粪便中带有黏液。肠侵袭性大肠杆菌是国际公认的食物中毒病原菌，主要黏附结肠黏膜上皮细胞并在此生长繁殖，死亡后产生内毒素，引起肠黏膜细胞的炎性反应和溃疡，出现血性腹泻。肠出血性大肠杆菌，可产生志贺样毒素，可导致出血性结肠炎、严重腹泻和便血。自1982年在美国首次从腹泻病人粪便中分离得到肠出血性大肠埃希菌（EHEC）O157:H7以来，由其引起的食源性疾病在发达国家和一些发展中国家不断发生，且呈逐年上升的趋势。大肠杆菌长期驻留在牛、羊、猪、鸡等家畜家禽的肠道中，造成动物的腹泻，并污染肉奶蛋制品、水源和粮食等，给畜牧业生产造成巨大的损失，对人们的健康构成了巨大威胁。其感染具有爆发流行趋势、致病性、致死性等特点，已经成为全球性的公共卫生问题。

在世界范围内，每年肠致病性大肠杆菌感染给人类和畜牧业造成巨大损失，每年引起200百万死亡（WHO,2002）。大肠杆菌可导致的疾病:1.肠道外感染:多为内源性感染，以泌尿系感染为主，如尿道炎、膀胱炎、肾盂肾炎。也可引起腹膜炎、胆囊炎、阑尾炎等。婴儿、年老体弱、慢性消耗性疾病、大面积烧伤患者，大肠杆菌可侵入血流，引起败血症。早产儿，尤其是生后30天内的新生儿，易患大肠杆菌性脑膜炎。2.急性腹泻:某些血清型大肠杆菌能引起人类腹泻。其中肠产毒性大肠杆菌会引起婴幼儿和旅游者腹泻，出现轻度水泻，也可呈严重的霍乱样症状。腹泻常为自限性，一般2～3天即愈，营养不良者可达数周，也可反复发作。肠出血性大肠杆菌会引起散发性或暴发性出血性结肠炎，可产生志贺氏毒素样细胞毒素。此外，肠致病性大肠杆菌是婴儿腹泻的主要病原菌，有高度传染性，严重者可致死。细菌侵入肠道后，主要在十二指肠、空肠和回肠上段大量繁殖。

致泻性大肠杆菌是大肠埃希氏菌（E.coli）中一类能引起食物中毒和婴儿腹泻的重要病原菌，并且它也是引起幼畜腹泻的重要病原菌。随着奶牛场规模扩大和犊牛饲养密度增加，犊牛腹泻大肠杆菌病已成为奶牛养殖业重要的疾病。该病主要有初生犊牛腹泻和犊牛败血症。其重要特征是能在感染家畜和婴儿的肠上皮细胞或在组织培养细胞表面形成特征性的组织病理学损伤，导致肠道内刷状边缘上皮细胞排列紊乱，使其功能受损而造成严重腹泻,称为粘附与脱落（A/E）。粘附和脱落大肠杆菌类似人的肠致病性大肠杆菌（EPEC），通过细菌外膜蛋白紧密素局灶性粘附于小肠上皮细胞表面，引起粘附和脱落（A/E）病变。其中EPEC，EIEC，EAEC有共同的致病机制：即能形成吸附擦拭损伤素（AttachingandEffacingLesionA/E），是由eae基因编码的。