[发明专利]一种从赭色小莫勒菌中提取藿烷醇的方法

权利要求书

1.一种从赭色小莫勒菌中提取藿烷醇的方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：

1） 赭色小莫勒菌活化后，取菌块接种到PDB培养基中，在120~160 r/min、20~28℃条件下连续培养5~10天即初级培养，按8％~10％接种量再次转接到PDB培养基中，继续在120~160 r/min、20~28℃条件下连续培养25~30天即次级培养；

2） 将培养液用减压抽滤装置过滤，得菌丝体和菌液，菌液直接用乙酸乙酯萃取，萃取液经旋转蒸发仪旋蒸得浸膏；菌丝体在28-35℃下干燥后研磨成粉状，加1~2倍体积的乙酸乙酯浸泡10～14小时，超声20～40分钟，浸提液经旋蒸得菌丝体浸膏，回收乙酸乙酯；

3） 将浸膏进行减压粗分，分别以石油醚、乙酸乙酯、丙酮、甲醇为洗脱剂依次进行洗脱，收集乙酸乙酯部分，经旋蒸得粗品；

4） 以石油醚：丙酮体积比=50:1～1:1梯度洗脱，收集石油醚：丙酮=10:1部分洗脱液，旋蒸浓缩，氯仿溶解，溶解液自然挥干，再经石油醚、甲醇重结晶得藿烷醇。

2.根据权利要求书1所述的从赭色小莫勒菌中提取藿烷醇的方法，其特征在于：所述步骤1）中PDB培养基为：200g马铃薯，20g葡萄糖，沸水煮30min，经4层纱布过滤后加单蒸水定容至1L，121℃高压灭菌，20min。

3.根据权利要求1所述的从赭色小莫勒菌中提取藿烷醇的方法，其特征在于：所述步骤1）中接种菌块的大小为1×1cm，接种量为2块。

4.根据权利要求1所述的从赭色小莫勒菌中提取藿烷醇的方法，其特征在于：所述步骤2）中，将菌液与乙酸乙酯按体积比1：1混合，倒入分液漏斗中，摇瓶萃取菌液2~4次，每次3～5 min。

5.根据权利要求1所述的从赭色小莫勒菌中提取藿烷醇的方法，其特征在于：所述步骤3）中进行粗分时减压柱的柱高7~10 cm，所用硅胶为200~300目。

6.根据权利要求1所述的从赭色小莫勒菌中提取藿烷醇的方法，其特征在于：所述步骤4）中将粗品进行梯度洗脱时，石油醚和丙酮的体积比每次降低10个单位，即梯度为50:1，40:1，30:1，20:1，10:1，1:1。