[发明专利]一种分离分析米力农的方法

说明书

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及一种分离分析米力农的方法。

背景技术

米力农的分子式为C₁₂H₉N₃O，分子量为211.22，化学名为1，6-二氢-2-甲基-6-氧代-[3，4’-二吡啶]-5-甲腈，其化学结构式如下：

米力农及米力农注射液是抗心力衰竭的药物，属于新型正性肌力药物中的磷酸二脂酶抑制剂，该药用于治疗各种原因引起的急、慢性顽固性充血性心力衰竭，而该病症用洋地黄、利尿剂、血管扩张剂治疗则无效或效果欠佳。米力农及其注射液在国内已生产上市，并有进口制剂。国内生产上市的药物为山东鲁南贝特制药有限公司生产的米力农注射液，进口药物为进口自原研企业法国赛诺菲制药的商品名为伊克维的乳酸米力农注射液。

在米力农中，通常不可避免地含有在制备过程中产生的中间体（例如1-(4-吡啶基)丙酮）、副产物（例如米力农有关物质A）以及其它杂质。这些物质存在于药物中会对药物的效果产生不利影响。因此，在制备米力农药物制剂时，需要对米力农进行分离分析，从而进行质量控制。

目前，分离分析米力农及其有关物质（包括工艺杂质，例如合成起始物料、中间体、副产物等；以及存放过程中产生的降解产物等）通常参照米力农美国药典标准（USP32-NF27）、米力农国家标准（WS1-(X-1090-2006Z)）及乳酸米力农进口复核标准中所记载的高效液相色谱（HPLC）法进行。

米力农美国药典标准（USP32-NF27）和米力农国家标准（WS1-(X-1090-2006Z)）中记载的流动相条件相同，都是采用乙腈-磷酸氢二钾溶液（磷酸氢二钾溶液的制备方法是：取磷酸氢二钾2.7g，加水800ml溶解后，加三乙胺2.4ml，用磷酸调pH值至7.5）作为流动相，其中乙腈与磷酸氢二钾溶液的体积比为20:80，检测波长为220nm。然而，用这两个标准中的方法进行米力农检测时，合成中间体1-(4-吡啶基)丙酮和米力农并不能有效分离。

此外，在米力农美国药典标准中，制备HPLC检测样品的方法为：将米力农与流动相混合，并在80℃水浴中进行超声溶解，样品浓度为2mg/ml。由于米力农在水中几乎不溶，在乙腈中略溶，因此用美国药典标准中的流动相在80℃水浴中超声来配制每1ml含2mg的米力农样品溶液时，很难使米力农溶解，并且溶解后放置在室温下时，米力农很容易析出。在米力农国家标准中，制备HPLC检测样品的方法为：直接将米力农与流动相混合，样品浓度是2mg/ml。然而，实际上这种方法并不能使米力农有效溶解，在实际操作中必须进行很长时间（大约40-60分钟）的超声，并且溶解后放置在室温下时，米力农很容易析出。不能使米力农有效溶解会影响对米力农的分析检测，同时也可能对液相系统造成损害。

乳酸米力农进口复核标准中所记载的方法采用甲醇-硼酸溶液（硼酸溶液浓度为0.01mol/L，用氢氧化钠调pH值至7.0）作为流动相，其中甲醇与硼酸溶液的体积比为32:68。然而，在用该方法检测时，发现米力农的理论塔板数较低，基线不平稳，能检测到的杂质数目较少。因此，该方法也不能有效地将米力农与其有关物质分离。

因此，需要找到能够更加有效地将米力农与其有关物质分离的分离分析方法。

发明内容

为解决上述现有技术中所存在的问题，本发明提供了一种分离分析米力农的方法。

具体而言，本发明提供了：

（1）一种分离分析米力农的方法，所述方法采用高效液相色谱对米力农样品进行检测，其中所述高效液相色谱以甲醇-磷酸盐溶液作为流动相，所述磷酸盐溶液包含二乙胺或三乙胺，并且所述磷酸盐溶液的pH为5.5-6.5。

（2）根据（1）所述的方法，其中所述磷酸盐溶液的pH为5.8-6.2，优选为6。

（3）根据（1）所述的方法，其中在所述磷酸盐溶液中，所述磷酸盐的浓度为0.01-0.05mol/L，优选为0.02mol/L；所述二乙胺或三乙胺占所述磷酸盐溶液的0.1-0.5体积%，优选占0.3体积%；所述磷酸盐溶液选自磷酸二氢钾溶液、磷酸氢二钾溶液、磷酸二氢钠溶液、磷酸氢二钠溶液、磷酸二氢铵溶液、磷酸氢二铵溶液，其中优选为磷酸二氢钾溶液。

（4）根据（1）所述的方法，其中在所述流动相中，所述甲醇与所述磷酸盐溶液的体积比为(10-25):(75-90)，优选为20:80。

（5）根据（1）所述的方法，其中所述米力农样品选自米力农原料药、乳酸米力农原料药、米力农注射液、和乳酸米力农注射液。