[发明专利]一种分枝杆菌增菌液及其制备方法及应用有效

申请号：	201310384401.7	申请日：	2013-08-29
公开（公告）号：	CN104419653B	公开（公告）日：	2017-06-06
发明（设计）人：	张敏;王娜;杨伟伟	申请（专利权）人：	山东鑫科生物科技股份有限公司
主分类号：	C12N1/20	分类号：	C12N1/20;C12R1/32
代理公司：	北京驰纳智财知识产权代理事务所(普通合伙)11367	代理人：	谢亮,武寄萍
地址：	252000 山***	国省代码：	山东;37
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摘要：
搜索关键词：	一种分枝杆菌增菌液及其制备方法应用
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【权利要求书】：

1.一种分枝杆菌增菌液，包括Middlebrook 7H9肉汤0.47-0.60份、脑心浸液肉汤0.5-1.0份、生物素0.0001-0.0003份、甘油0.25-0.63份、聚茴香脑磺酸钠0.01-0.03份、吐温80为0.01-0.03份、牛血清蛋白0.5-1.0份、油酸0.05-0.10份、蒸馏水100份。

2.如权利要求1所述的分枝杆菌增菌液，其特征在于，所述Middlebrook 7H9肉汤0.47份、脑心浸液肉汤0.5份、生物素0.0002份、甘油0.252份、聚茴香脑磺酸钠0.02份、吐温80为0.02份、牛血清蛋白0.5份、油酸0.06份、蒸馏水100份。

3.如权利要求1或2所述的分枝杆菌增菌液，其特征在于，还包括0.10-0.125份的胰蛋白胨和/或酪蛋白水解物。

4.如权利要求3所述的分枝杆菌增菌液，其特征在于，所述胰蛋白胨和/或酪蛋白水解物为0.12份。

5.一种分枝杆菌增菌液的制备方法，包括如下步骤：

(1)称取原料：取Middlebrook 7H9肉汤0.47-0.60份、脑心浸液肉汤0.5-1.0份、甘油0.25-0.63份、聚茴香脑磺酸钠0.01-0.03份、吐温80为0.01-0.03份、油酸0.05-0.10份均放置在灭菌后的容器中；

(2)原料混合：向步骤(1)中的容器中加入蒸馏水80份，并用玻璃棒搅拌容器中的混合物，使混合物均匀混合；

(3)调节pH值：向步骤(2)中的混合物中加入NaOH溶液和/或HCl溶液调节pH值，使混合物的pH值达到7.0-7.2；

(4)灭菌：将步骤(3)中调节pH值后的混合物进行湿热灭菌，灭菌后冷却至室温；

(5)称取生物素和牛血清蛋白：取0.0001-0.0003份的生物素和0.5-1.0份的牛血清蛋白放入灭菌后的容器中，然后向容器中加入20份的蒸馏水，并用玻璃棒搅拌，使生物素和牛血清蛋白溶解在蒸馏水中，形成混合溶液；

(6)过滤除菌：将步骤(5)中的混合溶液经无菌滤膜过滤除菌，此过程为无菌操作；

(7)无菌原料混合：将步骤(6)中的除菌后的混合溶液加入到步骤(4)中湿热灭菌后的混合物中，此过程为无菌操作。

6.如权利要求5所述的分枝杆菌增菌液的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述Middlebrook7H9肉汤0.47份、脑心浸液肉汤0.5份、甘油0.25份、聚茴香脑磺酸钠0.02份、吐温80为0.02份、油酸0.06份。