[发明专利]一种水产副产品源Ⅰ型胶原抗氧化肽的制备工艺

说明书

技术领域

本发明涉及一种水产副产品源Ⅰ型胶原抗氧化肽的制备工艺，属于生物技术领域。

背景技术

自由基严重威胁着人类的健康，现代研究表明：白内障、心血管疾病、动脉硬化、糖尿病、老年痴呆症及衰老等老龄病均被公认与自由基应激损伤密切相关。人工合成抗氧化剂的疗效得到医学界的普遍认可，但其毒副作用使其使用受到限制，高安全性的水产副产品源胶原抗氧化肽为研究的热点，可广泛应用于食品、保健品和化妆品等领域，具有巨大的市场前景。

水产副产品源胶原抗氧化肽上世纪90年代在国外得到广泛的研究，进入21世纪以后，国内关于水产副产品源胶原抗氧化肽的研究也取得丰硕的成果，部分产品获得国家保健品批号。水产副产品除含有Ⅰ型胶原蛋白外还含有Ⅱ、Ⅴ、Ⅺ不同类型的胶原蛋白，单一型胶原规模化制备技术成为制约单一型胶原活性肽产业化研发的瓶颈问题，目前未见有涉及利用水产副产品生产Ⅰ型胶原抗氧化肽的相关专利，现有的市面上的胶原抗氧化肽产品都为多种类型胶原肽混合物产品，未见Ⅰ型胶原抗氧化肽的产品上市。为了提高胶原抗氧化肽产品的附加值，急需开发一种水产副产品源Ⅰ型胶原抗氧化肽的制备工艺。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对目前水产副产品源胶原抗氧化肽存在的生产成本高、提取产率低、产品蛋白质含量低、生物活性低、安全性低、附加值低等问题，提供一种工艺简单安全、成本低、产品蛋白质含量高、生物活性高，且仅含有单一型胶原蛋白肽（Ⅰ型）的水产副产品源Ⅰ型胶原抗氧化肽的制备工艺，以充分利用水产副产品，变废为宝，开发高附加值的Ⅰ型胶原抗氧化肽。

为解决上述技术问题，本发明的技术解决方案是：

一种水产副产品源Ⅰ型胶原抗氧化肽的制备工艺，包括如下步骤：

1、一种水产副产品源Ⅰ型胶原抗氧化肽的制备工艺，其特征在于：它包括如下步骤：

（1）水产副产品的预处理

将水产副产品投入反应釜中，加入质量百分比浓度为1-5%的碱溶液搅拌除杂，搅拌后用水洗净；加入体积百分比浓度为0.5-5%的酸溶液搅拌除杂，脱脂脱灰去除水产副产物的脂肪和无机盐杂质；除杂后的水产副产物投入粉碎机中粉碎；

（2）Ⅰ型胶原蛋白的提取

将粉碎后的水产副产品置于反应釜中，加入水和相当于水产副产品投料重量0.01－0.1%的胃蛋白酶进行酶法提取，反应温度为1-4℃，反应pH值控制在1-3，反应时间为8-12h，得到Ⅰ型胶原蛋白粗提物，提取产率高于15％；

（3）Ⅰ型胶原蛋白的固液分离

利用离心机分离技术分离Ⅰ型胶原蛋白粗提物，除掉固体杂质；

（4）Ⅰ型胶原蛋白的盐析

步骤（3）所得清液加入等体积的质量百分比浓度为2-20%的无机盐溶液盐析；利用离心机分离技术分离盐析溶液，得到Ⅰ型胶原蛋白沉淀物；

（5）Ⅰ型胶原蛋白的脱盐

配置0.5M的醋酸溶液溶解Ⅰ型胶原蛋白沉淀物，利用膜分离技术去除Ⅰ型胶原蛋白溶液的无机盐，得到高纯Ⅰ型胶原蛋白溶液；

（6）Ⅰ型胶原抗氧化肽的制备

将步骤（5）所述的高纯Ⅰ型胶原蛋白溶液置于反应釜中，添加相当于水产副产品投料重量0.1－1%的蛋白酶，进行酶解反应，反应温度为50-55℃，酶解反应pH值控制在7-8，反应2-6小时，酶解反应结束，升温到85℃灭酶，得到Ⅰ型胶原抗氧化肽溶液；

（7）Ⅰ型胶原抗氧化肽的干燥

利用喷雾干燥技术干燥Ⅰ型胶原抗氧化肽溶液，得到蛋白质含量超过95％的Ⅰ型胶原抗氧化肽粉成品。

所述的步骤（1）预处理使用的碱为碳酸氢钠或氢氧化钠，所使用的酸为硫酸或盐酸或醋酸。

所述的步骤（1）粉碎温度为1-4℃。

所述的步骤（2）及步骤（6）控制反应pH值所用的碱为碳酸氢钠或氢氧化钠，所用的酸为硫酸或盐酸或醋酸。

所述的步骤（3）和步骤（4）中所用的离心机为转速为1000－4500rpm/min，离心温度为1-4℃。

所述的步骤（4）中利用无机盐盐析分离纯化，所使用的无机盐为硫酸铵或氯化钠，盐析温度为1-4℃。

所述的步骤（5）中膜分离技术所使用的膜设备为耐酸型卷式纳滤膜设备，所使用的膜截留平均相对分子质量为1kD－100kD。

所述的步骤（5）中膜分离技术除盐，往胶原蛋白溶液加入0.1M醋酸溶液，并控制胶原蛋白溶液温度为1-4℃。