[发明专利]一种酿酒酵母模块共转化组合筛选方法

权利要求书

1.一种酿酒酵母模块共转化组合筛选方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)每次从待筛选的启动子元件库、基因元件库和终止子元件库中各选一个元件组装到带有不同筛选标记的质粒上得到模块，不同的模块中，相同基因元件所选筛选标记相同，由模块组成模块库，进行测序确保模块库中的各模块序列正确；所述基因元件库中的基因元件为木糖还原酶基因、木糖醇脱氢酶基因、木酮糖激酶基因三种或vioA、vioB两种，所述筛选标记为Ura3、His3和Leu2中的任意两个或三个；

(2)对所述模块库中的模块进行排列组合设计，即将步骤(1)模块库中的模块按照筛选标记分为2或3组，从每组中选取一个模块组成一个组合；

(3)利用酿酒酵母质粒共转化技术，按照步骤(2)的设计，将与所述设计对应的模块转入酿酒酵母底盘菌中；

(4)将步骤(3)转化后的菌在选择缺陷型培养基上培养，得到步骤(2)所有排列组合的正确酿酒酵母转化子；

(5)结合目标性状的具体特征筛选得到高效模块组合的酿酒酵母转化子。

2.根据权利要求1所述的一种酿酒酵母模块共转化组合筛选方法，其特征在于所述质粒是在酿酒酵母中可自主复制的着丝粒型质粒或在酿酒酵母中可自主复制的游离型质粒。

3.根据权利要求2所述的一种酿酒酵母模块共转化组合筛选方法，其特征在于所述可自主复制的着丝粒型质粒为pRS416载体、PRS413载体或PRS415载体。

4.根据权利要求2所述的一种酿酒酵母模块共转化组合筛选方法，其特征在于所述在酿酒酵母中可自主复制的游离型质粒为PRS425载体或PRS426载体。

5.根据权利要求1所述的一种酿酒酵母模块共转化组合筛选方法，其特征在于所述酿酒酵母质粒共转化技术是96孔板醋酸锂转化法。