[发明专利]发酵培养基及制备方法和应用、乳酸菌葡聚糖的制备方法

权利要求书

1.一种发酵培养基，其特征在于，所述的发酵培养基为番茄汁蔗糖培养基，所述的番茄汁蔗糖培养基包括蔗糖和番茄汁水溶液。

2.如权利要求1所述的发酵培养基，其特征在于，所述的蔗糖与所述的番茄汁水溶液的质量体积比为1g:20mL～1g:5mL，较佳地为1g:10mL～1g:5mL，更佳地为3g:20mL；所述的番茄汁水溶液中番茄汁的浓度为20%～100%，较佳地为100%，所述的百分比为体积百分比。

3.一种如权利要求1或2所述的发酵培养基的制备方法，其特征在于，其包括下述步骤：将番茄汁水溶液与蔗糖混合至溶解，用碱调节pH，灭菌，即可；所述的番茄汁蔗糖培养基的pH为5.0～10.0。

4.如权利要求3所述的发酵培养基的制备方法，其特征在于，所述的番茄汁蔗糖培养基的pH为6.0～10.0，较佳地为7.0。

5.如权利要求3所述的发酵培养基的制备方法，其特征在于，所述的番茄汁水溶液中的番茄汁由下述方法制得：将成熟番茄洗净、去皮后，进行机械破碎，分离，取上清液，即可；所述的分离为过滤、抽滤和离心中的一种或多种；其中，所述的过滤的介质为多层纱布或无纺布；所述的离心为2000g～3000g，10min～20min离心。

6.如权利要求3所述的发酵培养基的制备方法，其特征在于，所述的碱为食品级碱，较佳地为Na₂CO₃、NaHCO₃和NaOH中的一种或多种；所述的灭菌的温度为95℃～125℃；所述的灭菌的时间为5min～30min。

7.一种如权利要求1或2所述的发酵培养基在制备乳酸菌葡聚糖中的应用。

8.一种乳酸菌葡聚糖的制备方法，其特征在于，其包括如下步骤：

（1）将肠膜明串珠菌（Leuconostoc mesenteroides）发酵菌种接种于发酵培养基中，好氧培养，得发酵液；所述的发酵培养基为如权利要求1或2所述的发酵培养基；

（2）将所述的发酵液加热，冷却，稀释，离心，取上清液直接加入乙醇，静置，收集沉淀物并溶于水，直接干燥，即可。

9.如权利要求8所述的乳酸菌葡聚糖的制备方法，其特征在于，所述的发酵菌种为肠膜明串珠菌（Leuconostoc mesenteroides）LM57、肠膜明串珠菌（Leuconostoc mesenteroides）LM79、肠膜明串珠菌（Leuconostoc mesenteroides）LD106和保藏号为CGMCC NO.6432的肠膜明串珠菌（Leuconostoc mesenteroides）BD1710中的一种或多种；所述的发酵菌种以种子液的形式接种，其中活菌数为1.0×10⁹～3.0×10⁹CFU/mL；所述的发酵菌种的接种量为0.5%～4.0%，较佳地为2.0%～4.0%，更佳地为2.0%，所述的百分比为种子液占发酵培养基的体积百分比。

10.如权利要求8或9所述的乳酸菌葡聚糖的制备方法，其特征在于，步骤（1）中，所述的好氧培养的温度为25℃～34℃，较佳地为25℃～31℃，更佳地为28℃；所述的好氧培养的时间为24h～54h，较佳地为30h～54h，更佳地为48h；所述的好氧培养的方式为摇床培养或发酵罐通气培养；

步骤（2）中，所述的加热的温度为95℃～100℃；所述的加热的时间为10min～30min；所述的冷却的终温为15℃～25℃；所述的稀释的稀释剂为无菌水；所述的无菌水与所述的发酵液的体积比为3:1～5:1；所述的离心为7000g～13000g，10min～20min离心；所述的乙醇的浓度为80%～100%，所述的百分比为体积百分比；所述的乙醇与所述的上清液的体积比为2:1～4:1；所述的静置的时间为4h～24h；所述的干燥为直接冷冻干燥、在温度不超过115℃下干燥或真空冷冻干燥。