[发明专利]甲磺酸帕珠沙星注射液右旋异构体的手性固定相检测法

权利要求书

1.甲磺酸帕珠沙星注射液右旋异构体的手性固定相检测法，其特征在于：采用基于手性配基交换流动相添加剂法的液相色谱检测，HPLC检测条件如下：

固定相：以5μm硅胶表面涂布有直链淀粉-三（3，5-二甲苯基氨基甲酸酯）为填充剂，或以5μm硅胶表面涂布有直链淀粉-三[（S）-α-甲苯基氨基甲酸酯]为填充剂；

流动相A：磷酸盐缓冲溶液；流动相B：乙腈或乙醇；

其中，磷酸盐缓冲溶液含：10mM-100mM磷酸二氢钾，以磷酸调节pH至1.5-4.0；

以流动相A，流动相B按体积比50～90:50～10配制流动相；

流速：1.0ml/min；

柱温：10～25℃；

检测波长：220nm-260nm；

理论板数按帕珠沙星左旋异构体峰计算应不低于2500，帕珠沙星左、右旋体异构体之间的分离度应符合要求。

2.根据权利要求1所述的甲磺酸帕珠沙星注射液右旋异构体的手性固定相检测法，其特征在于：所述磷酸盐缓冲溶液含：50mM磷酸二氢钾，以磷酸调节pH值至2.0。

3.根据权利要求1所述的甲磺酸帕珠沙星注射液右旋异构体的手性固定相检测法，其特征在于：当流动相B为乙腈时，流动相A：流动相B体积比为70：30；流动相B为乙醇时，流动相A：流动相B体积比为60：40。

4.根据权利要求1所述的甲磺酸帕珠沙星注射液右旋异构体的手性固定相检测法，其特征在于：所述柱温为20℃。

5.根据权利要求1所述的甲磺酸帕珠沙星注射液右旋异构体的手性固定相检测法，其特征在于：所述检测波长为240nm。

6.根据权利要求1-5任一项所述的甲磺酸帕珠沙星注射液右旋异构体的手性固定相检测法，其特征在于：采用以甲磺酸帕珠沙星对照品为对照的外标法进行定量检测，实施步骤为：

（1）供试品溶液的制备：取甲磺酸帕珠沙星注射液1ml，加样品溶剂定容至甲磺酸帕珠沙星注射液的25～100倍体积量，摇匀，作为供试品溶液；

（2）对照品溶液的制备：精密称取甲磺酸帕珠沙星对照品适量，用样品溶剂溶解并稀释制成每1ml约含帕珠沙星1～6μg的溶液，摇匀，作为对照品溶液；

（3）预试溶液的配制：取甲磺酸帕珠沙星消旋体适量，加样品溶剂溶解并稀释制成每1ml约含2～12μg帕珠沙星的溶液，摇匀，作为预试溶液；

检测前，按照HPLC检测条件，精密量取预试溶液20μl注入液相色谱仪，出峰顺序依次为帕珠沙星的左旋异构体和右旋异构体；再取对照品溶液20μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分峰的峰高约为满量程的20%；再精密量取供试品溶液和对照品溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，供试品溶液色谱图中如有与右旋异构体保留时间一致的色谱峰，按外标法以峰面积计算。

7.根据权利要求6所述的甲磺酸帕珠沙星注射液右旋异构体的手性固定相检测法，其特征在于：

（1）供试品溶液的制备：取甲磺酸帕珠沙星注射液1ml，加样品溶剂定容至甲磺酸帕珠沙星注射液的50倍体积量，摇匀，作为供试品溶液；

（2）对照品溶液的制备：精密称取甲磺酸帕珠沙星对照品适量，用样品溶剂溶解并稀释制成每1ml约含帕珠沙星3μg的溶液，摇匀，作为对照品溶液；

（3）预试溶液的配制：取甲磺酸帕珠沙星消旋体适量，加样品溶剂溶解并稀释制成每1ml约含6μg帕珠沙星的溶液，摇匀，作为预试溶液。

8.根据权利要求6所述的甲磺酸帕珠沙星注射液右旋异构体的手性固定相检测法，其特征在于：样品溶剂为流动相。

9.根据权利要求6所述的甲磺酸帕珠沙星注射液右旋异构体的手性固定相检测法，其特征在于：所述甲磺酸帕珠沙星对照品为具有相同紫外吸收的甲磺酸帕珠沙星各种光学构型的对照品，包括：单一左旋构型的对照品，单一右旋构型的对照品，消旋体对照品，以及各种不同比例构型混合的对照品。