[发明专利]一种高产3-羟基丁酮的基因工程菌及其构建方法和应用

权利要求书

1.一种高产3-羟基丁酮的基因工程菌，其特征在于，它是导入了乙酰乳酸脱羧反应酶的编码基因的梭菌。

2.根据权利要求1所述的高产3-羟基丁酮的基因工程菌，其特征在于，所述乙酰乳酸脱羧反应酶的编码基因来自于梭菌属、芽孢杆菌属或克雷伯氏菌属。

3.根据权利要求1或2所述的高产3-羟基丁酮的基因工程菌，其特征在于，所述乙酰乳酸脱羧反应酶的编码基因具体为如下1）至4）中任一所述的基因：

1）其核苷酸序列如SEQ ID No：1所示；

2）其核苷酸序列如SEQ ID No：2所示；

3）严格条件下可与序列表中SEQ ID No：1或SEQ ID No：2限定的DNA序列杂交且编码乙酰乳酸脱羧反应酶的DNA分子；

4）与SEQ ID No：1或SEQ ID No：2的序列具有90%以上的同源性且编码乙酰乳酸脱羧反应酶的DNA分子。

4.根据权利要求1所述的高产3-羟基丁酮的基因工程菌，其特征在于，所述的梭菌为丙酮丁醇梭菌(C.acetobutylicum)、拜氏梭菌(C.beijerinckii)、糖丁醇梭菌(C.saccharobutylicum)、糖丁醇丙酮梭菌(C.saccharoperbutylacetonicum)、丁酸梭菌(C.butyricum)、产芽孢梭(C.sporogenes)、巴氏梭菌(C.pasteurianum)、酪丁酸梭菌(C.tyrobutyricum)、产气荚膜梭菌(C.perfringens)或肉毒梭菌(C.botulinum)。

5.根据权利要求4所述的高产3-羟基丁酮的基因工程菌，其特征在于，所述梭菌为C.acetobutylicum ATCC824和C.acetobutylicum CGMCC5234。

6.权利要求1所述的高产3-羟基丁酮的基因工程菌的构建方法，其特征在于，从梭菌属、芽孢杆菌属或克雷伯氏菌属菌株中克隆乙酰乳酸脱羧反应酶的基因，并通过电转化的方法将其导入梭菌中进行表达。

7.权利要求1所述的高产3-羟基丁酮的基因工程菌在生产3-羟基丁酮中的应用。