[发明专利]一种咪唑立宾的提纯方法

说明书

技术领域

本发明属于制药工程技术领域，具体地说，涉及一种咪唑立宾的提纯方法。

背景技术

咪唑立宾（Mizoribine，简称MZB）是一种由土壤霉菌(Eupenicillium brefeldianum)产生的咪唑类抗生素。作为免疫抑制剂，临床上可用于抑制肾移植排斥反应，也可用于治疗狼疮性肾炎、类风湿性关节炎及肾病综合征等自身免疫性疾病。

咪唑立宾主要通过发酵法生产，其纯化处理过程中，需要对发酵液中的咪唑立宾进行富集和脱色处理。目前，通常采用纳滤膜浓缩的方法进行富集处理，但该方法浓缩效率较低，成本较高。而脱色处理主要采用超滤的方法，但该方法脱色后的料液中咪唑立宾浓度大幅下降，物料损失较为严重。此外，传统的纯化处理方法所得产品多为咪唑立宾的一水合物，该化合物性质不稳定，不便于储存和运输。为提高咪唑立宾的稳定性，美国专利US5442051公开了一种将咪唑立宾一水合物加入到乙醇中加热回馏制备无水咪唑立宾的方法，所得无水咪唑立宾性质稳定，但该方法所得产物晶粒细小，制剂分装困难，不利于工业生产。

发明内容

本发明的目的是提供一种咪唑立宾的提纯方法，该方法所得产品稳定性好、收率高、纯度高。

为实现本发明目的，本发明提供了以下提纯方法，其步骤为：

（1）向咪唑立宾发酵液中加入酸，调节pH至2.5-5.5，再加入絮凝剂，过滤得到粗滤液； 

（2）将粗滤液通过脱色柱，流速为每小时0.5-2.0倍柱床体积，收集流出液，得到一次脱色液，所述脱色柱的填料为阳离子交换树脂； 

（3）向一次脱色液中加入碱性溶液，调节pH至7.5-10.5，加载至吸附柱上，流速为每小时0.5-2.0倍柱床体积，加载完毕后以纯化水洗脱至流出液为中性，再以酸性洗脱液进行洗脱，收集流出液，得到一次富集液，所述吸附柱的填料为强碱性阴离子交换树脂；

（4）向一次富集液中加入碱性溶液，调节pH至8.0-10.0，加载至富集柱上，流速为每小时0.5-2.0倍柱床体积，加载完毕后以纯化水洗脱至流出液为中性，再以酸性洗脱液进行洗脱，收集流出液，得到二次富集液；所述富集柱的填料为强碱性阴离子交换树脂；

根据富集液单位高低，本操作可以重复进行，得到n次富集液；

（5）将二次（或n次）富集液通过脱色柱，流速为每小时0.5-2.0倍柱床体积，收集流出液，得到二次脱色液，所述脱色柱的填料为强酸性阳离子脱色树脂；

（6）将二次（或n次）脱色液减压浓缩后，冷却结晶，过滤，滤饼水洗后压实，40℃真空干燥，得到咪唑立宾粗粉；

（7）将咪唑立宾粗粉溶于85-90℃的纯化水中，向其中加入沸腾的无水乙醇，搅拌后，冷却结晶，过滤，滤饼用无水乙醇冲洗后压实，40℃真空干燥，得到咪唑立宾精粉。

为了进一步提高产品收率，本发明上述步骤中，步骤（6）过滤后，可将所得滤液回收，并入步骤（3）所述一次富集液；步骤（7）过滤后，可将所得滤液回收，减压蒸馏除去乙醇，并入步骤（3）所述一次富集液。

本发明所述酸可以是乙酸、盐酸、磷酸水溶液中任意一种，最好是乙酸；所述碱性溶液为氢氧化钾、氢氧化钠水溶液中的任意一种，最好是氢氧化钠水溶液。

本发明所述阳离子交换树脂最好是大孔型苯乙烯-二乙烯苯系列强酸性树脂。所述强碱性阴离子交换树脂为大孔型苯乙烯-二乙烯苯系列强碱性树脂。

本发明所述酸性洗脱液最好为乙酸水溶液，其浓度最好为0.2-2M/L。

本发明所述富集柱，其柱床体积最好为所述吸附柱柱床体积的1/3-1/10。

本发明步骤（6）所述二次脱色液，减压浓缩后，其中咪唑立宾的浓度最好为0.3-0.8g/mL。

本发明步骤（7）所述咪唑立宾粗粉溶于85-90℃的纯化水中，得到咪唑立宾水溶液，其中咪唑立宾的含量为0.6-0.9 g/mL；所述沸腾的无水乙醇，其用量为所述咪唑立宾水溶液体积的8-12倍，上述条件下，咪唑立宾结晶速度快、结晶完全。

本发明步骤（1）中，最好将pH调节至3.5-4.5，所述絮凝剂优选的分子量为1000-1200万的阳离子聚丙烯酰胺。絮凝剂的浓度按质量百分比计优选0.1%。