[发明专利]新环脂肽抗生素罗克霉素(locillomycin)A、B、C及其制造方法有效

专利信息
申请号: 201310416487.7 申请日: 2013-09-13
公开(公告)号: CN103524600A 公开(公告)日: 2014-01-22
发明(设计)人: 罗楚平;陈志谊;刘雪辉;郭俊尧;王晓宇;刘邮洲 申请(专利权)人: 江苏省农业科学院
主分类号: C07K7/06 分类号: C07K7/06;C12P21/02;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30;C07K1/20;A61K38/08;A61P31/04;A61P31/10;A61P31/12;C12R1/125
代理公司: 北京华科联合专利事务所(普通合伙) 11130 代理人: 孟旭;王为
地址: 210014 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 新环脂肽 抗生素 霉素 locillomycin 及其 制造 方法
【权利要求书】:

1.一组环脂肽抗生素,包括罗克霉素A、罗克霉素B、罗克霉素C,其结构式分别如下: 

2.权利要求1所述环脂肽抗生素的制备方法,其特征是所说方法包括以下步骤: 

1)罗克霉素A、B、C的发酵培养; 

2)罗克霉素A、B、C的提取分离; 

3)罗克霉素A、B、C的色谱检测; 

4)罗克霉素A、B、C的结构鉴定。

3.如权利要求2所述的制备方法,其特征是发酵培养系将生长于斜面的枯草芽胞杆菌Bs916菌株(保藏编号为:CGMCC No.0808)接种于试管培养基,在旋转摇床上培养,然后转入摇瓶培养基继续培养,收获发酵液。 

4.如权利要求2所述的制备方法,其特征是提取分离系在发酵培养液中,发酵液离心除去菌体,用浓盐酸调pH至2.8,离心得到沉淀,甲醇抽提,过0.22μmol·L-1微孔滤膜后即为粗提物;粗提物先经氨基固相萃取柱对含有目标化合物的组分进行分离,洗脱溶剂为采用含有不同剂量甲酸的甲醇溶液;对含有目标化合物的组分然后采用碳18固相萃取柱进行纯化,洗脱溶剂为含有不同梯度的甲醇水溶液;对含有目标产物的洗脱液氮气吹干甲醇后,真空干燥得到白色固体粉末即为目标化合物罗克霉素组合物的纯化物;罗克霉素组合物的纯化物最后继续采用碳18固相萃取柱进行分离,洗脱溶剂为更为精细梯度的甲醇水溶液,依次收集含有目标化合物的洗脱液,收集洗脱液氮气吹干甲醇后,真空干燥得到白色固体粉末依次为目标化合物罗克霉素A、B、C的纯化物。 

5.如权利要求2或4所述的制备方法,其特征是高效液相色谱检测条件为:采用C18(5μm;250by4.6mm;VYDAC218TP;VYDAC,Hesperia,CA)柱;流动相为乙腈﹕水﹕三氟乙酸(50﹕50﹕0.5vol/vol);流速为0.5mL·min-1;紫外检测波长为230nm;检测结果表明提取的罗克霉素A、B、C已达到色谱纯,保留时间分别为9.0min,13.0min,17.8min。 

6.如权利要求2或4所述的制备方法,其特征是结构鉴定系根据根据紫外光谱、氨基酸分析、Edman降解测序、多级质谱MS-MS、NMR实验(主要包括1H-NMR、13C-NMR、13C-edited HSQC、HMBC、COSY、TOCSY、NOESY或ROESY等)数据的综合分析,确定了罗克霉素A、B、C的结构。确定目标化合物罗克霉素A、B和C的结构。 

7.含有权利要求1所述环脂肽抗生素的药物组合物,其特征是所说组合物系以罗克霉素A、B、C为有效成分,分别与一种或多种药上可以接受的载体所组成。 

8.权利要求1所述环脂肽抗生素在制备抗真菌、细菌、病毒药物中应用。 

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