[发明专利]优化的牛凝乳酶原基因及其分泌表达方法和应用有效
| 申请号： | 201310421943.7 | 申请日： | 2013-09-16 |
| 公开（公告）号： | CN103484488A | 公开（公告）日： | 2014-01-01 |
| 发明（设计）人： | 张伟;张宇宏;刘波;张艳丽 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院生物技术研究所 |
| 主分类号： | C12N15/57 | 分类号： | C12N15/57;C12N15/81;C12N1/19;C12N9/64;C12R1/84 |
| 代理公司： | 北京康思博达知识产权代理事务所(普通合伙) 11426 | 代理人： | 余光军 |
| 地址： | 100081 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 优化 凝乳 基因 及其 分泌 表达 方法 应用 | ||
1.优化的牛凝乳酶原基因，其特征在于：其核苷酸序列为SEQ ID No.1、SEQ ID No.2或SEQ ID No.3所示。
2.含有权利要求1所述优化的牛凝乳酶原基因的重组表达载体。
3.按照权利要求2所述的重组表达载体，其特征在于：所述的重组表达载体是重组真核表达载体。
4.按照权利要求3所述的重组表达载体，其特征在于：所述的重组真核表达载体是重组酵母表达载体，优选为重组毕赤酵母(Pichia pastoris)表达载体。
5.含有权利要求2-4任何一项所述重组表达载体的重组宿主细胞。
6.按照权利要求5所述的重组宿主细胞，其特征在于：所述重组宿主细胞是重组酵母细胞，优选为重组毕赤酵母(Pichia pastoris)细胞。
7.一种重组牛凝乳酶的生产方法，包括：将权利要求1所述的优化的牛凝乳酶原基因可操作性的与表达载体相连接得到重组表达载体；将所述重组表达载体转化宿主细胞，得到重组菌株；培养重组菌株，诱导重组牛凝乳酶的表达，回收并纯化所表达的重组牛凝乳酶，即得。
8.按照权利要求7所述的方法，其特征在于：所述的重组表达载体优选为重组真核表达载体，优选为重组酵母表达载体，更优选为重组毕赤酵母表达载体。
9.按照权利要求7所述的方法，其特征在于：所述的宿主细胞为酵母细胞，优选为毕赤酵母(Pichia pastoris)细胞。
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