[发明专利]一种有效获取血清小分子代谢物信息的方法

权利要求书

1.一种有效获取血清小分子代谢物信息的方法，其特征在于：

①制备待分析血清样本的质量控制样本（QC），经二步法衍生后，通过气质联用分析获得相应的质谱全扫数据，经AMDIS（自动质谱去卷积和鉴定系统）处理后，建立初始的SIM表；②改变分析条件，增大进样量，减小分流比，获得相应的第二个质谱全扫数据，以获取更多低丰度代谢物的信息；③引入ChromaTOF软件的去卷积功能，分别对同一QC样本获得的两种全扫数据进行去卷积，代谢物定性后，找出新增定性的代谢物；④将新增定性的代谢物特征离子添加于初始SIM表，形成最终的SIM表，应用最终的SIM表对待分析血清样本进行选择离子扫描方式的气质联用分析，获得各个样本的代谢物含量信息。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于：于所述血清样本中加入内标后，再进行气质联用分析；获得各个代谢物的峰面积后，将各个代谢物的峰面积与内标峰面积的比值乘以10⁶，作为其在血清中的相对含量，即获得血清小分子代谢物的含量信息。

3.根据权利要求1所述方法，其特征在于：所述二步法衍生是将血清样本先经甲氧胺吡啶溶液进行肟化反应，再经N-甲基-N-三甲基硅烷三氟乙酰胺进行硅烷化反应，生成相应的衍生产物。

4.根据权利要求1所述方法，其特征在于：步骤①对衍生完的QC样本进行分析，获得质谱全扫数据后，经AMDIS处理，利用获得的各个代谢物的色谱保留时间，生成初始的SIM表，SIM表中包括QC样本中各个代谢物的色谱保留时间、峰的起点时间、落点时间、对应的特征离子，如表1所示。

5.根据权利要求1所述方法，其特征在于：所述步骤②改变分析条件为：增大气相色谱的进样量至步骤①原来进样量的2倍、减小分流比至步骤①原来分流比的1/2倍，将更多量的样品引入色谱柱，对QC样本进行分析，进一步获取低丰度代谢物的信息，即保留时间和特征离子。

6.根据权利要求1所述方法，其特征在于：利用ChromaTOF软件对两种分析条件下获得的QC样本质谱全扫数据进行去卷积，根据谱库检索、样本验证、质谱图人工对比进行代谢物定性。

7.根据权利要求1所述方法，其特征在于：气相色谱-质谱联用系统中，质谱包括四极杆质谱、或三重四极杆质谱。

8.根据权利要求1所述方法，其特征在于：将新增的鉴定代谢物特征离子添加于初始的SIM表，完成SIM表的建立，新增代谢物的离子由ChromaTOF软件提供，或根据目标离子在相邻色谱峰的相对强度来确定。

9.根据权利要求2所述方法，其特征在于：应用血清样本中加入的内标-十三酸，定量血清中的代谢物，内标加入量40μg/mL。

10.根据权利要求1所述方法，其特征在于：采用QC样本在PCA分布图中的聚类情况、QC样本间的相关系数、QC中各代谢物RSD分布情况对该方法进行评价。