[发明专利]硫化镉包覆的氧化锌纳米阵列复合材料的制备方法以及用于多种肿瘤细胞检测的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种制备硫化镉包覆的氧化锌纳米阵列复合材料及其方法，以及将该材料应用于检测HepG2肝癌细胞(或者其他目标肿瘤细胞)的方法。

背景技术

氧化锌是一种重要的宽禁带半导体材料，具有良好的光学和电学性质，在传感器等高科技领域具有广泛的应用前景。有序氧化锌纳米阵列因其较高的比表面积及较快的电子传输能力，是理想的光学材料。硫化镉是另外一种常用的半导体材料，具有良好的光电性质，可用于电致化学发光免疫分析之中。

癌症是威胁人类生命的重要疾病之一，而肝癌是癌症中较为常见的一种，因此如何早期检测和诊断肝癌成为全世界的研究热点之一。目前医院里面采取的检测手段多为酶联免疫分析方法，该方法通过检测肿瘤细胞标志物间接检测肿瘤细胞，因此灵敏度较低，难以早期发现并防治。国内外的科学家尝试多种方法检测癌细胞，希望实现提高灵敏度，达到早发现早治疗的目的，方法包括化学发光方法、融出伏安法和计时电流法等。然而，上述方法通常具有分析检测时间长、操作繁琐等缺点。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供一种硫化镉包覆的氧化锌纳米阵列复合材料的制备方法以及基于该纳米复合材料的高灵敏检测癌细胞的方法，该方法具有操作简单、反应速度快、效果好、选择性高和成本低等优点。

本发明按照如下步骤制备硫化镉包覆的氧化锌纳米阵列复合材料：

（1）纳米氧化锌阵列材料的合成：以水热法制备ZnO纳米棒阵列修饰的ITO电极；

（2）硫化镉包覆的氧化锌纳米阵列复合材料的合成：将清洗好的纳米氧化锌阵列材料分别依次浸入到1 ~1.5 mL的硫化钠溶液 (浓度为0.2 mol/mL)和1 ~1.5mL氯化镉溶液(浓度为0.2 mol/mL)，每次加入试剂后反应时间为3~5 分钟，去离子水冲洗，备用，即得具有硫化镉包覆的氧化锌纳米阵列复合材料的ITO电极。

本发明按照如下步骤检测癌细胞：

（1）纳米氧化锌阵列材料的合成：以水热法制备ZnO纳米棒阵列修饰的ITO电极；

（2）硫化镉包覆的氧化锌纳米阵列复合材料的合成：将清洗好的纳米氧化锌阵列材料分别依次浸入到1 ~1.5 mL的硫化钠溶液 (浓度为0.2 mol/mL)和1 ~1.5mL氯化镉溶液(浓度为0.2 mol/mL)，每次加入试剂后反应时间为3~5 分钟，去离子水冲洗，备用，即得具有硫化镉包覆的氧化锌纳米阵列复合材料的ITO电极；

（3）金纳米粒子的合成：将 1.00~1.5 mL 、1~2 wt.%的柠檬酸钠溶液滴加到100~150  mL、 0.01~0.02 wt.%的氯金酸的沸腾溶液中，回流搅拌反应10~30分钟后，停止加热，在密封条件下，继续搅拌至恢复到室温，备用；

（4）生物传感器的组装：将步骤（2）中得到的具有硫化镉包覆的氧化锌纳米阵列复合材料的ITO电极用去离子水冲洗，用氮气将该电极吹干；在其表面上滴加5~ 10微升的 3-氨基丙基-三乙氧基硅烷的水溶液，置于氮气氛围中，10~30分钟后，将步骤（3）中制备好的金纳米粒子10~20微升滴加到已被APTES修饰好的ITO电极表面，置于氮气氛围内，反应0.5~1 小时左右，将肿瘤细胞抗体修饰到电极的表面，置于37℃孵育箱中备用；

（5）采用电致化学发光技术对癌细胞进行检测。

本发明的方法重点在于利用化学沉积法实现了纳米阵列材料的制备，利用静电作用实现了纳米材料的修饰和组装，最后将合成的纳米阵列材料应用于癌细胞的生物传感器的制备，实现了对肝癌细胞的灵敏检测，具有操作简单、反应速度快、效果好、选择性强、成本低等优点。该方法还可以通过改变修饰的抗体种类实现对多种肿瘤细胞的检测，可用于科研方面和临床医学方面，尤其是在生物分析领域，肿瘤细胞检测等方面有很强的应用前景。

附图说明

    图1为HepG2细胞检测曲线，其中：X轴细胞浓度的对数值，Y轴电致化学发光强度值。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明的技术方案作进一步的说明，但并不局限如此，凡是对本发明技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围，均应涵盖在本发明的保护范围中。

以HepG2肝癌细胞为例，本发明的基于纳米复合阵列材料的高灵敏检测肝癌细胞的方法，包括如下步骤：