[发明专利]一种水酶法-半仿生法提取茶叶籽中黄酮的方法

权利要求书

1.一种水酶法-半仿生法提取茶叶籽中黄酮的方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）茶叶籽粉制备：茶叶籽干燥去壳，粉碎过筛,得到茶叶籽粉；

（2）水酶法提取：按照茶籽粉与反应液的料液重量/体积比为1：3-6，称取茶叶籽粉，在此茶叶籽粉中先加入部分水，加热3-8分钟以消灭茶叶籽粉自身酶活性，然后冷却至室温，加入已配置好的酶液及剩余的水，得到茶叶籽粉混合液，搅拌均匀，在51-55℃、搅拌条件下酶解0.5-2.0h；

（3）半仿生法提取：在酶解后的茶叶籽粉混合液中加入乙醇和水，使料液重量/体积比为1:25、乙醇的体积百分比浓度为60%，调节pH值为1.5-2.0，在80℃水浴中回流提取25-40min，然后在3500-4500r/min下离心5-15min，将离心后的上清液取出备用；滤渣用体积百分比浓度为60%的乙醇清洗，再分别调节pH至7-7.5和8.0-8.5重复上述的回流提取、离心分离步骤；合并三次离心液，旋转蒸发、干燥即得目的产物。

2.如权利要求1所述的水酶法-半仿生法提取茶叶籽中黄酮的方法，其特征在于：所述步骤（2）中酶液为纤维素酶溶解于部分蒸馏水中制成，纤维素酶的用量为6-12mg/g茶叶籽粉；所述酶液配制时在0-5℃条件下快速进行。

3.如权利要求1-2任一所述的水酶法-半仿生法提取茶叶籽中黄酮的方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）茶叶籽粉制备：茶叶籽去壳，粉碎过筛，烘干至恒重,得到茶叶籽粉；

（2）水酶法提取：按照茶籽粉与反应液的料液重量/体积比为1：4，称取茶叶籽粉，先加入部分水，加热4分钟以消灭茶叶籽粉自身酶活性，然后冷却至室温，加入已配置好的酶液及剩余的水，得到茶叶籽粉混合液，搅拌均匀，在53℃、搅拌条件下酶解0.85h；所述酶液为纤维素酶溶解于部分蒸馏水中在0-5℃条件下快速制成，纤维素酶的用量为10mg/g茶叶籽粉；

（3）半仿生法提取：在酶解后的茶叶籽粉混合液加入乙醇和水，使料液重量/体积比为1:25、乙醇的体积百分比浓度为60%，调节pH值为2.0，在80℃水浴中回流提取30min，然后在4000r/min下离心10min，将离心后的上清液取出备用；滤渣用体积百分比浓度为60%的乙醇清洗，再分别调节pH至7.4和8.0重复上述的回流提取、离心分离步骤；合并三次离心液，旋转蒸发、干燥即得目的产物。