[发明专利]一种广升麻总甾酮及广升麻总甾酮胶囊指纹图谱检测技术及其应用

权利要求书

1.一种广升麻总甾酮及广升麻总甾酮胶囊指纹图谱的构建方法，包括如下步骤：

A.广升麻总甾酮供试液：取广升麻总甾酮提取物样品适量，用45％的甲醇溶液，超声处理至全部溶解，放冷摇匀后稀释成含蜕皮甾酮的溶液滤过，用微孔滤膜过滤，取续滤液，即得；广升麻总甾酮胶囊供试液：取广升麻总甾酮胶囊内容物适量，精密称取约120mg置25ml量瓶中，加甲醇溶液适量，超声处理，用微孔滤膜过滤，取续滤液，即得；

B.液相色谱法测定供试液指纹图谱：将A步骤制备的供试液在一定色谱条件下进样即得；一定的色谱条件为：C18色谱柱；流动相：乙腈(A)-0.04mol/L磷酸二氢钠溶液(用磷酸调pH为3.0)(5：95)体系；线性梯度洗脱程序；柱温35℃；流速1.0ml/min；紫外检测器检测；检测波长为243nm；进样量：20μl；运行60min。

2.权利要求1所述的广升麻总甾酮及广升麻总甾酮胶囊指纹图谱的构建方法，所述的C18ODS色谱柱，Agilent ZORBAX SB-AQ柱尤其适用。

3.权利要求1所述的一种广升麻总甾酮及广升麻总甾酮胶囊指纹图谱的构建方法，所述的对照指纹图谱的获得方法为：取广升麻总甾酮提取物样品适量，精密称定用45％甲醇适量，超声处理至全部溶解，放冷摇匀后并稀释成每1mL含600μg的溶液，过滤，取续滤液即得；取广升麻总甾酮胶囊，各取本品胶囊20粒，精密称定，研细。精密称取约120mg置25ml量瓶中，加45％甲醇适量，超声10分钟使溶解，用微孔滤膜过滤，取续滤液，即得；按如下色谱条件分析：色谱柱为Agilent ZORBAX SB-AQ柱(4.6mm×250mm，5μm)，流动相：乙腈(A)-0.04mol/L磷酸二氢钠溶液(用磷酸调pH为3.0)(5：95)体系；柱温35℃；流速1.0ml/min；紫外检测器检测；检测波长为243nm；进样量：20μl；线性梯度，运行60min；获取广升麻总甾酮、广升麻总甾酮胶囊样品的指纹图谱，用相似度软件进行分析，以该平均指纹图谱为对照指纹图谱。

4.权利要求3所述的一种广升麻总甾酮及广升麻总甾酮胶囊指纹图谱的构建方法，所述的一定的色谱条件下线性梯度洗脱程序，具体条件如下：乙腈(A)-0.04mol/L磷酸二氢钠溶液(用磷酸调pH为3.0)(5：95)体系；线性梯度洗脱程序：0～5min10％～15％乙腈；5～20min15％～19％乙腈；20～30min19％乙腈；30～40min19％～35％乙腈；40～50min35％～80％乙腈；50～60min80％乙腈。

5.权利要求4所述的一种广升麻、广升麻总甾酮及广升麻总甾酮胶囊指纹图谱的构建方法，所得的广升麻总甾酮对照图谱具有9个特征峰，以蜕皮甾酮对照品峰(即3号峰)，一其峰保留时间为1，计算共有指纹峰的相对保留时间，图谱总长度为60min，广升麻总甾酮胶囊对照图谱具有9个特征峰，10mg规格胶囊的相对保留时间/min(特征峰序号)0.70±10％(1)、0.71±10％(2)、1.00±10％(3[S])、1.13±10％(4)、1.31±10％(5)、1.44±10％(6)、1.76±10％(7)、1.90±10％(8)、2.06±10％(9)；5mg规格胶囊的相对保留时间/min(特征峰序号)0.70±10％(1)、0.71±10％(2)、1.00±10％(3[S])、1.13±10％(4)、1.31±10％(5)、1.44±10％(6)、1.76±10％(7)、1.90±10％(8)、2.06±10％(9)。