[发明专利]一种诱导川贝母胚状体产生的方法

权利要求书

1.一种诱导川贝母胚状体产生的方法，其特征在于：它包括以下步骤：

S1：选取川贝母植株的幼嫩叶鞘为外植体，用流水冲洗干净后，用浓度为70%～75%的酒精消毒30～60s，然后用浓度为0.1%～0.15%的升汞消毒4～10min，最后用无菌水震荡洗3～6次，洗后用已灭菌的滤纸吸干材料表面的水分，将经过处理的叶鞘接种于培养基MS+6-BA 0.5～2.0mg·L^-1+2，4-D 1～2mg·L^-1+IAA 0.1～1mg·L^-1 +蔗糖20～60g·L^-1+琼脂5.0～7.0g·L^-1中进行培养，所采用的培养温度16～20℃、每天光照6～14h、光照强度为1000～2000lx的条件下诱导愈伤组织；

S2：选取经过S1步骤处理的颜色为白色和淡黄色的愈伤组织，切成大小为0.5～2.5cm²，然后接入MS+头孢噻肟钠200～600mg·L^-1培养基中培养40～60天得到愈伤组织胚状体；

S3：将愈伤组织胚状体以1～3个为1组切下，接入其快速生长培养基MS+6-BA 0.1～1mg·L^-1+头孢噻肟钠100～450mg·L^-1中，所采用的培养温度为15～25℃、每天光照6～20小时、光照强度为800～2500lx的培养条件下培养50～60天后，得到川贝母小植株。

2.根据权利要求1所述的一种诱导川贝母胚状体产生的方法，其特征在于：S1步骤中所述的外植体是位于茎基部端的幼嫩叶鞘。

3.根据权利要求1所述的一种诱导川贝母胚状体产生的方法，其特征在于：S1步骤中所述的培养基为MS+6-BA 0.58mg·L^-1+2，4-D 1.5mg·L^-1+IAA 0.5mg·L^-1 +蔗糖40g·L^-1 +琼脂6.0g·L^-1。

4.根据权利要求1所述的一种诱导川贝母胚状体产生的方法，其特征在于：S1步骤中所述的培养温度为20℃、每天光照10h、光照强度为1500lx。

5.根据权利要求1所述的一种诱导川贝母胚状体产生的方法，其特征在于：S2步骤中所述的培养基为MS+头孢噻肟钠200～600mg·L^-1，培养条件为温度15～22℃、每天光照8～16h、光照强度为1500～2500lx。

6.根据权利要求1所述的一种诱导川贝母胚状体产生的方法，其特征在于：S2步骤中所述的培养基为MS+头孢噻肟钠400mg·L^-1，培养条件为温度18℃、每天光照12h、光照强度为1800lx的条件下培养50天。

7.根据权利要求1所述的一种诱导川贝母胚状体产生的方法，其特征在于：S3步骤中所述的胚状体按2个为1组切下，接入胚状体快速生长培养基MS+6-BA 0.5mg·L^-1+头孢噻肟钠300 mg·L^-1中，所采用培养温度为22℃、每天光照16小时、光照强度为2000lx的培养条件下培养60天。

8.根据权利要求1所述的一种诱导川贝母胚状体产生的方法，其特征在于：在完成S3步骤培养后，打开培养瓶盖在室内炼苗2～4天后，将川贝母小植株从培养瓶中取出，洗去植株上的培养基后，再将其移栽至松软的土壤中生长。