[发明专利]一种红霉素链霉菌发酵生产红霉素的培养基和培养方法有效
申请号: | 201310441432.1 | 申请日: | 2013-09-25 |
公开(公告)号: | CN103484515A | 公开(公告)日: | 2014-01-01 |
发明(设计)人: | 任勇;奇乃;王忠中 | 申请(专利权)人: | 宁夏泰瑞制药股份有限公司 |
主分类号: | C12P19/62 | 分类号: | C12P19/62;C12R1/465 |
代理公司: | 宁夏专利服务中心 64100 | 代理人: | 徐淑芬 |
地址: | 750101 宁夏*** | 国省代码: | 宁夏;64 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 红霉素 霉菌 发酵 生产 培养基 培养 方法 | ||
1.一种红霉素链霉菌发酵生产红霉素的培养基,包括一级种子培养基、二级种子培养基和发酵培养基,其特征在于上述一级种子培养基、二级种子培养基和发酵培养基中均含有甘蔗糖蜜、啤酒酵母干渣和蚯蚓粉。
2.按照权利要求1所述的红霉素链霉菌发酵生产红霉素的培养基,其特征在于所述一级种子培养基的组成为:甘蔗糖蜜15~20g/L、油5~10ml/L、啤酒酵母干渣20~25g/L、蚯蚓粉8~12g/L、硫酸铵0.03~0.05g/L、氯化钠0.9~1g/L、轻质碳酸钙0.2~0.4g/L、硅油消泡剂0.01~0.03g/L。
3.按照权利要求1所述的红霉素链霉菌发酵生产红霉素的培养基,其特征在于所述二级种子培养基的组成为:甘蔗糖蜜25~30g/L、油12~16ml/L、啤酒酵母干渣25~30g/L、蚯蚓粉11~17g/L、硫酸铵0.06~0.08g/L、氯化钠0.9~1g/L、轻质碳酸钙0.4~0.6g/L、硅油消泡剂0.02~0.04g/L。
4.按照权利要求1所述的红霉素链霉菌发酵生产红霉素的培养基,其特征在于所述发酵培养基的组成为:甘蔗糖蜜25~35g/L、油10~15ml/L、啤酒酵母干渣30~35g/L、蚯蚓粉15~20g/L、硫酸铵0.07~0.09g/L、氯化钠0.9~1g/L、轻质碳酸钙0.4~0.6g/L、S-腺苷甲硫氨酸1~5g/L、氯化钴0.006~0.008g/L 硫酸镁0.04~0.05g/L、硫酸锌0.03~0.05g/L、硫酸铜0.06~0.08g/L、硅油消泡剂0.02~0.03g/L。
5.按照权利要求1、2、3或4所述的红霉素链霉菌发酵生产红霉素的培养基,其特征在于所述啤酒酵母干渣的质量要求为:
蛋白质含量≥45%;磷含量≥60ug/ml;水分≤5%;灰分≤5%;碳水化合物≥12%;干渣颗粒通过60目筛的数量≥80%。
6.按照权利要求1、2、3或4所述的红霉素链霉菌发酵生产红霉素的培养基,其特征在于所述蚯蚓粉的质量要求:蛋白质含量≥60%;水分≤10%;粒度能通过80目筛。
7.按照权利要求1、2、3或4所述的红霉素链霉菌发酵生产红霉素的培养基,其特征在于所述甘蔗糖蜜在使用前进行预处理,预处理过程为:
1)甘蔗糖蜜中加入饮用水,使其粘度控制在100cp以下;
2)加热升温至30~35℃,
3)超滤,超滤膜材料为醋酸纤维素或聚氧乙烯,超滤过程中,物料的流量控制在4~5L/min,超滤压力控制在0.2MPa
4)加入蔗糖转化酶,蔗糖转化酶用量(g)=蔗糖甜蜜重量(kg)×0.35。
8.一种红霉素链霉菌利用权利要求2-4任意一项培养基发酵生产红霉素的培养方法,其特征在于其工艺步骤为:首先将已经培养好的红霉素链霉菌母瓶发酵液按照0.8~1L/m3接种量接入一级种子培养基中进行一级种子培养,至菌体浓度35~40%、pH值7~8、培养周期为20~25h时转移到二级种子培养基中进行二级种子培养,至菌体浓度35~40%、pH值7~8、培养周期为22~27h时转移至发酵培养基中培养,至发酵单位在11000u/ml以上且每6~8h检测的发酵单位相差300u/ml以内、菌体浓度35~40%、发酵周期为150~160h时终止发酵。
9.按照权利要求8所述的培养方法,其特征在于所述一级种子培养基、二级种子培养基和发酵培养基在使用前首先进行灭菌,其中
灭菌后的一级种子培养基的质量要求:氨基氮50~60mg/100ml、溶磷>50ug/ml、总糖30~40g/100ml、pH6.5~7.5;
灭菌后的二级种子培养基的质量要求:氨基氮60~70mg/100ml、溶磷>50ug/ml、总糖30~40g/100ml、pH:6.5~7.5;
灭菌后的发酵培养基的质量要求:氨基氮50~60mg/100ml、溶磷>60ug/ml、总糖40~50g/100ml、pH:6~7。
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