[发明专利]一种胆酸钠含量的测定方法

权利要求书

1.一种胆酸钠含量的测定方法，其特征在于：包括：

（1）配制待测胆酸钠溶液；

（2）分别配制猪去氧胆酸标准溶液和鹅去氧胆酸标准溶液；

（3）用高效液相色谱法测定待测胆酸钠溶液中猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸的含量。

2.根据权利要求1所述的胆酸钠含量的测定方法，其特征在于：所述步骤（3）中，所述高效液相色谱法步骤如下：以0.125%乙酸为流动相A，乙腈为流动相B，线性梯度洗脱：0～18min，60%A；18～22min，60%A→40%A；22～23min，40%A→20%A；23～33min，20%A；33～35min，20%A→60%A；35～40min，60%A；流速为1ml/min；采集时间40分钟，最后，根据猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸的标准样品溶液测得的标准曲线，以胆酸钠样品溶液峰面积的大小来确定胆酸钠样品中猪去氧胆酸和鹅去氧胆酸的含量。

3.根据权利要求1或2所述的胆酸钠含量的测定方法，其特征在于：所述步骤（1）中，配制待测胆酸钠溶液包括如下步骤：

（1.1）称定待测胆酸钠样品置于烧瓶中，加入氢氧化钠溶液和乙醇加热至沸腾，并通过冷凝管回流至烧瓶中；

（1.2）向烧瓶中的回流液滴加硫酸调节PH值，放冷；

（1.3）通过分液漏斗用乙酸乙酯振摇提取烧瓶中的回流液并过滤形成乙酸乙酯提取液；

（1.4）除去乙酸乙酯提取液中的乙酸乙酯，并干燥至恒重；

（1.5）将干燥物加甲醇溶解并稀释至容量瓶刻度，将稀释液过滤后再次稀释至容量瓶刻度，得到待检测胆酸钠溶液。

4.根据权利要求3所述的胆酸钠含量的测定方法，其特征在于：所述步骤（1.1）中，回流液回流至烧瓶后，用水冲洗冷凝管，过滤，并将洗液置于分液漏斗中，用热水分别洗涤烧瓶和分液漏斗并合并至烧瓶。

5.根据权利要求4所述的胆酸钠含量的测定方法，其特征在于：所述步骤（1.1）中，称定待测胆酸钠样品0.5g，加15%氢氧化钠溶液30ml与乙醇5ml，加热回流6小时，用30ml水冲洗冷凝管，过滤，并将洗液置于分液漏斗中，5ml热水洗涤烧瓶和分液漏斗各2次，并将洗液和热水合并至烧瓶。

6.根据权利要求3所述的胆酸钠含量的测定方法，其特征在于：所述步骤（1.2）中，向回流液滴加硫酸使其PH值为2～3。

7.根据权利要求3所述的胆酸钠含量的测定方法，其特征在于：所述步骤（1.3）中，形成乙酸乙酯提取液后，用水冲洗分液漏斗，用乙酸乙酯振摇提取冲洗液，过滤后与前述乙酸乙酯提取液合并。

8.根据权利要求7所述的胆酸钠含量的测定方法，其特征在于：所述步骤（1.3）中，烧瓶中的回流液用乙酸乙酯振摇提取4次，依次为60ml、40ml、40ml、30ml，过滤后合并形成乙酸乙酯提取液，随后用水冲洗分液漏斗2次，每次10ml，用15ml乙酸乙酯振摇提取，过滤后与前述乙酸乙酯提取液合并。

9.根据权利要求3所述的胆酸钠含量的测定方法，其特征在于：所述步骤（1.4）中，通过蒸发方式除去乙酸乙酯提取液中的乙酸乙酯，并在105℃通过蒸发干燥至恒重。

10.根据权利要求3所述的胆酸钠含量的测定方法，其特征在于：所述步骤（1.5）中，用30ml甲醇溶解干燥物，接着用2ml甲醇冲洗，合并至50ml容量瓶，将甲醇稀释至刻度，将稀释液过滤，取50ml容量瓶，再加甲醇稀释至刻度，得到待检测胆酸钠溶液。