[发明专利]特异性沙门氏菌H:z29诊断血清工程菌株的构建方法

权利要求书

1. 一种能够制备特异性沙门氏菌H:z29诊断血清的工程菌株，其特征在于：它是将含有编码鞭毛抗原z29基因的重组质粒pTrc99a-fliC(z29)，转入表面鞭毛抗原合成基因缺失的沙门氏菌G4831△fliC△fljB中得到的能够有效表达鞭毛抗原z29的工程菌株。

2.权利要求1所述的能够制备特异性沙门氏菌H:z29诊断血清的工程菌株，其特征在于：它是将fliC基因用质粒pKD3上的氯霉素乙酰转移酶基因替换，将fljB基因用质粒pKD4上的卡那霉素抗性基因替换，通过抗生素初步筛选出缺失菌株，再经过PCR鉴定及测序鉴定，得到相应的缺失菌株G4831△fliC△fljB，然后再将构建的重组质粒pTrc99a-fliC(z29)转入其中，筛选得到能够有效表达鞭毛抗原z29的工程菌株。

3.权利要求2所述的能够制备特异性沙门氏菌H:z29诊断血清的工程菌株，其中所述一相鞭毛抗原合成基因缺失菌株G4831△fliC，缺失后基因大小约为1100bp（氯霉素乙酰转移酶基因），其序列为SEQ ID NO：1。

4.权利要求2所述的能够制备特异性沙门氏菌H:z29诊断血清的工程菌株，其中所述二相鞭毛抗原合成基因缺失菌株G4831△fliC△fljB，缺失后基因大小约为1500bp（卡那霉素抗性基因），其序列为SEQ ID NO：2。

5.一种特异性沙门氏菌系列诊断血清工程菌株的构建方法，其特征在于按如下步骤进行：

(1)表面鞭毛抗原合成基因缺失菌株(G4831△fliC△fljB)的构建；

(2)重组质粒pTrc99a-fliC(z29)的构建；

(3)含有重组质粒pTrc99a-fliC(z29)的克隆菌株的构建。