[发明专利]液态调味品中丙烯酰胺含量的快速检测方法

权利要求书

1.一种液态调味品中丙烯酰胺含量的快速检测方法，其特征在于具体包括以下步骤：

1）样品前处理：称取样品，并加入内标物后，加水稀释，并与硅藻土混合均匀，获得已经混合样品的硅藻土；取玻璃层析柱依次装入棉花、下层无水硫酸钠、已经混合样品的硅藻土以及上层无水硫酸钠，敲实，平衡；

2）丙烯酰胺的净化及提取：向步骤1）的玻璃层析柱中加入乙酸乙酯，控制流速进行3～5次吸附洗脱，得洗脱液A；将洗脱液A进行浓缩，用乙酸乙酯溶液洗涤并转移到离心管中；在室温下将浓缩液吹近干，然后加水超声溶解，再加入正己烷涡旋后离心，取水层过滤，获得待测提取液B；

3）仪器检测：将步骤2）中所得待测提取液B放入超高效液相色谱-串联四级杆质谱联用仪中采用正离子电离模式和多反应监测模式进行检测，通过内标法定量，经3分钟色谱分析检测出样品中丙烯酰胺的含量；

步骤1）中所述的样品为基质复杂的色深液态调味品。

2.根据权利要求1所述的液态调味品中丙烯酰胺含量的快速检测方法，其特征在于：步骤1）中所述的样品为生抽、老抽和卤水汁中的一种。

3.根据权利要求1所述的液态调味品中丙烯酰胺含量的快速检测方法，其特征在于：步骤1）中所述的内标物为甲基丙烯酰胺；内标物在提取液B中的终浓度为0.02～0.2ug/mL。

4.根据权利要求1所述的液态调味品中丙烯酰胺含量的快速检测方法，其特征在于：步骤1）中所述的样品与水的质量比为1～3：7～9；

步骤1）中所述的样品与水的质量和等于所用硅藻土的质量。

5.根据权利要求1所述的液态调味品中丙烯酰胺含量的快速检测方法，其特征在于：步骤1）中所述的平衡的时间为3～6min；

步骤1）中所述的下层无水硫酸钠和上层无水硫酸钠的柱高分别为1～2cm。

6.根据权利要求1所述的液态调味品中丙烯酰胺含量的快速检测方法，其特征在于：步骤2）中所述的洗脱中每次所用乙酸乙酯的量为10～20ml；

步骤2）中所述的控制流速为1滴/秒的流速；

步骤2）中所述的用乙酸乙酯溶液洗涤的次数为3～5次；

步骤2）中所述的吹干为用氮气吹干。

7.根据权利要求1所述的液态调味品中丙烯酰胺含量的快速检测方法，其特征在于：步骤2）中所述的加水的加入量为1～5ml；水和正己烷的用量的体积比为1～5：3～5；

步骤2）中所述的离心为在4000～8000r/min下离心5～10min；

步骤2）中所述的过滤为用0.22um的过滤膜过滤。

8.根据权利要求1所述的液态调味品中丙烯酰胺含量的快速检测方法，其特征在于：步骤3）所述的色谱条件为：

色谱柱为超高效液相色谱专用C18色谱柱；

流动相A为乙酸铵甲酸溶液，流动相B为甲醇，流速为0.2mL/min；所述的乙酸铵甲酸溶液浓度为5～10nmol/mL，其中甲酸体积浓度为0.05～0.1%；

流动相梯度洗脱条件：a）甲醇：5%线性变化至40%～65%，用时2～3min；b）甲醇：40%～65%马上变化至5%，保持1～2min。

9.根据权利要求1所述的液态调味品中丙烯酰胺含量的快速检测方法，其特征在于：步骤3）中所述的电离模式为ESI+。

10.根据权利要求1所述的液态调味品中丙烯酰胺含量的快速检测方法，其特征在于：步骤3）中所述的多反应监测模式条件为：

丙烯酰胺：定量离子对：71.9>54.6，一级锥孔电压20～25kv，碰撞能量：5.0～11.0kv，驻留时间为0.1～0.4min；定性离子对：71.9>43.8，一级锥孔电压20～25kv，碰撞能量5.0～11.0kv，驻留时间为0.1～0.4min；

甲基丙烯酰胺：离子对：85.7>57.6，一级锥孔电压20～25kv，碰撞能量：5.0～11.0kv，驻留时间为0.1～0.4min。