[发明专利]一种发芽糙米抗氧化肽的提取方法

权利要求书

1. 一种发芽糙米抗氧化肽的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）糙米浑浊液制备：取新制备的发芽糙米，在常温下，加入pH值为8.0~pH11的碱液，所述发芽糙米的质量与碱液体积之比为1g∶4～7mL，浸泡2~4h，然后采用高速组织捣碎机在剪切速度5000~10000 rpm条件下剪切5~15 min，获得糙米浑浊液；

（2）中性蛋白酶水解：采用0.8～1.2mol/L的酸液将步骤（1）所得糙米浑浊液的pH值调至7.0，添加相当于糙米浑浊液质量4.5~10 %的中性蛋白酶，搅拌，在温度30~40℃的条件下酶解反应80~120 min，每隔4～8min采用0.05-0.15 mol/L的 NaOH溶液将酶解液的pH控制在6.5～7.5之间；所述中性蛋白酶的酶活为1×10⁶U/g；

（3）灭酶：步骤（2）所述酶解反应结束后，将所得酶解液的温度升至70~98℃，灭酶5~20 min，然后冷却至常温，采用0.05-0.15 mol/L NaOH溶液将酶解液pH值调至8.0~10.0；

（4）离心分离：将步骤（3）获得的酶解液在2000~4000 rpm离心10~20 min，获上清液；

（5）真空浓缩：将步骤（4）获得的上清液经半透膜脱盐，在0.01-0.06MPa，40-60℃进行真空浓缩，浓缩至原液体积的5~15%；

（6）冷冻干燥：将步骤（5）所得的浓缩液冷冻干燥至粉末状，预冻速率为1~5℃/min，干燥室真空度为50~500 Pa，在-30~-10℃时预冻10~30 min，干燥至水分含量为5~10%，即成。

2.根据权利要求1所述的发芽糙米抗氧化肽的提取方法，其特征在于，步骤（1）中，所述碱液为碳酸盐缓冲溶液。

3.根据权利要求2所述的发芽糙米抗氧化肽的提取方法，其特征在于，所述碳酸盐缓冲溶液为碳酸钠缓冲溶液或者碳酸氢钠缓冲液。

4.根据权利要求1～3之一所述的发芽糙米抗氧化肽的提取方法，其特征在于，步骤（2）中，所述酸液为柠檬酸溶液或者盐酸溶液。

5.根据权利要求1～3之一所述的发芽糙米抗氧化肽的提取方法，其特征在于，步骤（1）中，所述pH值为9.5。

6.根据权利要求1～3之一所述的发芽糙米抗氧化肽的提取方法，其特征在于，步骤（1）中，所述发芽糙米的质量与浸泡碱液体积之比为1g∶5mL。

7.根据权利要求1～3之一所述的发芽糙米抗氧化肽的提取方法，其特征在于，步骤（1）中，所述浸泡的时间为4h，剪切速度为8000r/min，剪切的时间为8min。

8.根据权利要求1～3之一所述的发芽糙米抗氧化肽的提取方法，其特征在于，步骤（2）中，所述酸液的浓度为1.0mol/L。

9.根据权利要求1～3之一所述的发芽糙米抗氧化肽的提取方法，其特征在于，步骤（2）中，所述中性蛋白酶的加入量相当于糙米浑浊液质量的5.0%。

10.根据权利要求9所述的发芽糙米抗氧化肽的提取方法，其特征在于，步骤（2）中，酶解反应温度为35℃，酶解反应时间为100 min，每隔5min采用0.1mol/L的NaOH溶液，将酶解液的pH控制在7.0。