[发明专利]一种发芽糙米抗氧化肽的提取方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种发芽糙米抗氧化肽的提取方法，尤其涉及一种采用高速剪切和酶辅助偶联技术提取发芽糙米抗氧化肽的方法。 

背景技术

随着近年来生物活性肽研究的进展，人们发现，从天然动植物蛋白质提取分离的多肽，具有抗氧化特性强、活性稳定、无毒副作用及来源方便等优点，被广泛应用于医药和食品领域。 

稻米作为我国的主食，其含有的营养成分和生物活性物质种类和数量直接影响全民的身体素质。大米蛋白质具有高生物效价、低过敏性等重要特点，而大米蛋白经酶作用制备的多肽已经被证明具有较强的抗氧化活性（张君慧. 大米蛋白抗氧化肽的制备、分离纯化和结构鉴定[D]. 无锡：江南大学，2009）。 

发芽糙米是将糙米经发芽至一定的芽长，所得到的一种由幼芽和带糠层的胚乳组成的糙米制品，与普通大米相比，其营养素更丰富，所含大米蛋白抗氧化肽也更丰富(何新益等.糙米发芽前后抗氧化活性比较研究[J].中国粮油学报，2009，24（11）：6-8.)。 

目前，大米抗氧化肽的制备方法，主要有酶法制备（张君慧等.大米蛋白酶解制备抗氧化肽的研究[J]，食品与发酵工业，2008，34（5）：71-75）与超声波预处理结合酶法制备（贾俊强等. 超声预处理大米蛋白制备抗氧化肽[J]，农业工程学报，2008, 24(8): 288-293）两种。这些方法，制备时间长，效率低，DPPH清除能力损失率高。 

发明内容

本发明要解决的技术问题是，提供一种制备效率高，产品纯度高及抗氧化活性高，制造成本低，适于工业化生产的从发芽糙米提取抗氧化肽的方法。 

本发明解决其技术问题采用的技术方案是，一种发芽糙米抗氧化肽的提取方法，包括以下步骤： 

（1）糙米浑浊液制备：取新制备的发芽糙米，在常温下，加入pH值8.0~pH11（优选pH9.5）的碱液，发芽糙米的质量与浸泡碱液体积之比为1g∶4～7 mL（优选1g∶5 mL），浸泡2~5h（优选4 h），然后采用高速组织捣碎机在剪切速度5000~10000rpm（优选8000r/min）条件下剪切5~15 min（优选8min），获得糙米浑浊液；

（2）中性蛋白酶水解：采用0.8～1.2mol/L（优选1.0mol/L）的酸液将步骤（1）所得糙米浑浊液的pH调至7.0，添加糙米浑浊液质量的4.5~10 %（优选5.0%）的中性蛋白酶，搅拌，在温度30~40 ℃（优选35℃）的条件下酶解反应80~120 min（优选100min），每隔4～8min（优选5min）采用0.05-0.15 mol/L（优选0.1mol/L）的NaOH溶液将酶解液的pH控制在6.5～7.5（优选7.0）之间；所述中性蛋白酶的酶活优选1×10⁶U/g；

（3）灭酶：步骤（2）所述酶解反应结束后，将酶解液温度升至70~98℃，高温灭酶5~20 min，然后冷却至常温，采用0.05-0.15 mol/L NaOH溶液将酶解液pH值调至8.0~10.0；

（4）离心分离：将步骤（3）获得的酶解液在2000~4000 rpm离心10~20 min，获上清液；

（5）真空浓缩：将步骤（4）获得的上清液经半透膜脱盐，在0.01-0.06MPa，40-60℃进行真空浓缩，浓缩至原液体积的5~15%；

（6）冷冻干燥：将步骤（5）所得的浓缩液冷冻干燥至粉末状，预冻速率为1~5℃/min，干燥室真空度为50~500 Pa，在-30~-10℃时预冻10~30 min干燥至水分含量为5~10%，即为发芽糙米多肽产品成品。

进一步，所述步骤（1）中的碱液为碳酸盐缓冲溶液。 

进一步，所述碳酸盐为碳酸钠或者碳酸氢钠。 

进一步，步骤（2）中，所述酸液为柠檬酸溶液或者盐酸溶液。 

以上所述步骤（3）灭酶、（4）离心分离、（5）真空浓缩、（6）冷冻干燥均有现有技术可资借鉴，本说明书所述工艺条件只是优选条件。 

发芽糙米多肽抗氧化活性评价方法：