[发明专利]一种用于肉毒杆菌LAMP核酸检测引物组和试剂盒

权利要求书

1.一种用于肉毒杆菌LAMP核酸检测引物组，其特征在于，包括，

外侧正向引物，其为SEQ ID No.1所示的多核苷酸序列；

外侧反向引物，其为SEQ ID No.2所示的多核苷酸序列；

内侧正向茎环引物，其为SEQ ID No.3所示的多核苷酸序列；

内侧反向茎环引物，其为SEQ ID No.4所示的多核苷酸序列。

2.一种用于肉毒杆菌LAMP核酸检测的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述引物组。

3.如权利要求2所述的用于肉毒杆菌LAMP核酸检测的试剂盒，其特征在于，包括含有权利要求1所述的引物组的反应体系，25μl所述反应体系的配置为：8U/μl的链置换DNA聚合酶，2μl浓度为10mM内侧正向茎环引物，2μl浓度为10mM的内侧反向茎环引物，0.5μl浓度为10mM外侧正向引物，0.5μl浓度为10mM外侧反向引物，2.5μl10×PCR缓冲液，1μl浓度为10mM的dNTPs，1μl浓度为1～10μg/μl的待检测基因组DNA提取液，1.25μl20×DNA荧光染料和13.25μl双蒸水。

4.如权利要求3所述的用于肉毒杆菌LAMP核酸检测的试剂盒，其特征在于，所述DNA荧光染料为10000×SYBR Green I。

5.如权利要求2所述的用于肉毒杆菌LAMP核酸检测的试剂盒，其特征在于，以待测肉毒杆菌DNA作为检测组，以肺炎球菌DNA、大肠杆菌DNA、金黄色葡萄球菌DNA、鼠伤寒沙门氏菌DNA、破伤风梭菌DNA和白色念珠菌DNA做为阴性对照组，用权利要求2所述试剂盒配制所述反应体系进行LAMP检测，之后用紫外分析仪测量所述反应体系的荧光强度。

6.如权利要求5所述的用于肉毒杆菌LAMP核酸检测的试剂盒，其特征在于，与所述阴性对照组相比所述检测组荧光强度增强说明待检测样品为肉毒杆菌。

7.如权利要求5所述的用于肉毒杆菌LAMP核酸检测的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒的检测反应条件为：95℃预变性5min，65℃恒温反应1h和80℃孵育10min。