[发明专利]检测IDH1、IDH2基因多态突变位点的引物、方法和试剂盒在审

专利信息
申请号: 201310459219.3 申请日: 2013-09-30
公开(公告)号: CN103451314A 公开(公告)日: 2013-12-18
发明(设计)人: 周晓犊;王淑一 申请(专利权)人: 南京艾迪康医学检验所有限公司
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12N15/11
代理公司: 杭州裕阳专利事务所(普通合伙) 33221 代理人: 应圣义
地址: 211100 江苏省南京市江宁*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 检测 idh1 idh2 基因 突变 引物 方法 试剂盒
【权利要求书】:

1.检测IDH1、IDH2基因多态热点突变情况的引物,其特征在于,包括:

(ⅰ) 扩增IDH1基因的引物,其碱基序列为:

IDH1-132-F: GATGAGAAGAGGGTTGAGGA

IDH1-132-R: GTTGGAAATTTCTGGGCCAT

 (ⅱ) 扩增IDH2基因的引物,其碱基序列为:

     IDH2-140/172-F: CTGTGTTGTTGCTTGGGGTT

IDH2-140/172-R: CAAGAGGATGGCTAGGCGAG。

2.如权利要求1所述的引物,其特征在于,还包括测序引物,其碱基序列为:

(ⅰ) 检测IDH1基因的测序引物碱基序列为:

IDH1-132-F: GATGAGAAGAGGGTTGAGGA

IDH1-132-R: GTTGGAAATTTCTGGGCCAT

 (ⅱ) 检测IDH2基因的测序序列的引物碱基序列为:

     IDH2-140/172-F: CTGTGTTGTTGCTTGGGGTT

IDH2-140/172-R: CAAGAGGATGGCTAGGCGAG。

3.如权利要求1所述的引物,其特征在于,引物序列IDH1-132-F和IDH1-132-R是扩增IDH1基因包含第132位氨基酸序列的引物。

4.如权利要求1所述的引物,其特征在于,引物序列IDH2-140/172-F和IDH2-140/172-R是扩增扩增IDH2基因包含第140、第172位氨基酸序列的引物。

5.检测IDH1、IDH2基因多态热点突变情况的方法,包括以下步骤:

抽提血液中的组织DNA;

用PCR扩增步骤1中提取的DNA;

对步骤2中的扩增产物进行测序;

对测序结果进行判断,确定IDH1、IDH2基因是否发生突变;

其中PCR扩增引物为:

(ⅰ) 扩增IDH1基因的引物,其碱基序列为:

IDH1-132-F: GATGAGAAGAGGGTTGAGGA

IDH1-132-R: GTTGGAAATTTCTGGGCCAT

 (ⅱ) 扩增IDH2基因的引物,其碱基序列为:

     IDH2-140/172-F: CTGTGTTGTTGCTTGGGGTT

IDH2-140/172-R: CAAGAGGATGGCTAGGCGAG。

6.如权利要求5所述的方法,其特征在于,测序引物碱基序列为:

(ⅰ) 检测IDH1基因的测序引物碱基序列为:

IDH1-132-F: GATGAGAAGAGGGTTGAGGA

IDH1-132-R: GTTGGAAATTTCTGGGCCAT

 (ⅱ) 检测IDH2基因的测序序列的引物碱基序列为:

     IDH2-140/172-F: CTGTGTTGTTGCTTGGGGTT

IDH2-140/172-R: CAAGAGGATGGCTAGGCGAG。

7.一种检测IDH1、IDH2基因多态突变位点的试剂盒,包括

(i) 组织DNA抽提试剂;

(ii) 检测体系PCR扩增反应液;

(iii) 测序体系试剂;

(iv)阳性对照品和阴性对照品;

其中PCR扩增反应液引物为:

(ⅰ) 扩增IDH1基因的引物,其碱基序列为:

IDH1-132-F: GATGAGAAGAGGGTTGAGGA

IDH1-132-R: GTTGGAAATTTCTGGGCCAT

 (ⅱ) 扩增IDH2基因的引物,其碱基序列为:

     IDH2-140/172-F: CTGTGTTGTTGCTTGGGGTT

IDH2-140/172-R: CAAGAGGATGGCTAGGCGAG。

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