[发明专利]检测IDH1、IDH2基因多态突变位点的引物、方法和试剂盒在审
申请号: | 201310459219.3 | 申请日: | 2013-09-30 |
公开(公告)号: | CN103451314A | 公开(公告)日: | 2013-12-18 |
发明(设计)人: | 周晓犊;王淑一 | 申请(专利权)人: | 南京艾迪康医学检验所有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 杭州裕阳专利事务所(普通合伙) 33221 | 代理人: | 应圣义 |
地址: | 211100 江苏省南京市江宁*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 idh1 idh2 基因 突变 引物 方法 试剂盒 | ||
1.检测IDH1、IDH2基因多态热点突变情况的引物,其特征在于,包括:
(ⅰ) 扩增IDH1基因的引物,其碱基序列为:
IDH1-132-F: GATGAGAAGAGGGTTGAGGA
IDH1-132-R: GTTGGAAATTTCTGGGCCAT
(ⅱ) 扩增IDH2基因的引物,其碱基序列为:
IDH2-140/172-F: CTGTGTTGTTGCTTGGGGTT
IDH2-140/172-R: CAAGAGGATGGCTAGGCGAG。
2.如权利要求1所述的引物,其特征在于,还包括测序引物,其碱基序列为:
(ⅰ) 检测IDH1基因的测序引物碱基序列为:
IDH1-132-F: GATGAGAAGAGGGTTGAGGA
IDH1-132-R: GTTGGAAATTTCTGGGCCAT
(ⅱ) 检测IDH2基因的测序序列的引物碱基序列为:
IDH2-140/172-F: CTGTGTTGTTGCTTGGGGTT
IDH2-140/172-R: CAAGAGGATGGCTAGGCGAG。
3.如权利要求1所述的引物,其特征在于,引物序列IDH1-132-F和IDH1-132-R是扩增IDH1基因包含第132位氨基酸序列的引物。
4.如权利要求1所述的引物,其特征在于,引物序列IDH2-140/172-F和IDH2-140/172-R是扩增扩增IDH2基因包含第140、第172位氨基酸序列的引物。
5.检测IDH1、IDH2基因多态热点突变情况的方法,包括以下步骤:
抽提血液中的组织DNA;
用PCR扩增步骤1中提取的DNA;
对步骤2中的扩增产物进行测序;
对测序结果进行判断,确定IDH1、IDH2基因是否发生突变;
其中PCR扩增引物为:
(ⅰ) 扩增IDH1基因的引物,其碱基序列为:
IDH1-132-F: GATGAGAAGAGGGTTGAGGA
IDH1-132-R: GTTGGAAATTTCTGGGCCAT
(ⅱ) 扩增IDH2基因的引物,其碱基序列为:
IDH2-140/172-F: CTGTGTTGTTGCTTGGGGTT
IDH2-140/172-R: CAAGAGGATGGCTAGGCGAG。
6.如权利要求5所述的方法,其特征在于,测序引物碱基序列为:
(ⅰ) 检测IDH1基因的测序引物碱基序列为:
IDH1-132-F: GATGAGAAGAGGGTTGAGGA
IDH1-132-R: GTTGGAAATTTCTGGGCCAT
(ⅱ) 检测IDH2基因的测序序列的引物碱基序列为:
IDH2-140/172-F: CTGTGTTGTTGCTTGGGGTT
IDH2-140/172-R: CAAGAGGATGGCTAGGCGAG。
7.一种检测IDH1、IDH2基因多态突变位点的试剂盒,包括
(i) 组织DNA抽提试剂;
(ii) 检测体系PCR扩增反应液;
(iii) 测序体系试剂;
(iv)阳性对照品和阴性对照品;
其中PCR扩增反应液引物为:
(ⅰ) 扩增IDH1基因的引物,其碱基序列为:
IDH1-132-F: GATGAGAAGAGGGTTGAGGA
IDH1-132-R: GTTGGAAATTTCTGGGCCAT
(ⅱ) 扩增IDH2基因的引物,其碱基序列为:
IDH2-140/172-F: CTGTGTTGTTGCTTGGGGTT
IDH2-140/172-R: CAAGAGGATGGCTAGGCGAG。
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