[发明专利]睡莲花的鉴别和含量测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及睡莲花的一种鉴别和含量测定方法，属于分析化学领域。

背景技术

睡莲花为睡莲科雪白睡莲(Nymphaea candidaPresl．)的干燥花蕾，分布于我国新疆的南部地区，收载于《中华人民共和国卫生部药品标准．维吾尔药分册》(1999年版)，具有降热止咳、益心护脑，安神止痛的作用，临床主要用于感冒发热，头痛咳嗽，咽痛解表等症。在维吾尔医药中用药历史长久，是维吾尔医常用的单方或复方抗病毒药中的主要成分。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有的缺陷，提供了快速、准确的睡莲花的鉴别和含量测方法。

本发明的目的通过以下技术方案具体实现：

    睡莲花的一种鉴别和含量测定方法，包括睡莲花中没食子酸和烟花苷的薄层鉴别方法和含量测定方法，具体步骤如下：

步骤一、采用薄层色谱法对睡莲花中的没食子酸和烟花苷进行定性分析

在硅胶GF254薄层板上，分别点没食子酸-甲醇溶液、睡莲花药材-甲醇溶液，在聚酰胺薄膜上，点烟花苷-甲醇溶液、睡莲花药材-甲醇溶液，以乙酸乙酯-甲酸-水按体积比为8:1:1为展开剂展开，取出，晾干，置于荧光灯下检视；

步骤二、采用高效液相色谱法对睡莲花中没食子酸和烟花苷进行含量测定

   1）对照品的制备

a.精密称取对照品没食子酸和烟花苷，加甲醇制成没食子酸和烟花苷的对照品储备液，浓度分别为0.650mg/ml、0.531mg/ml；

b.分别吸取没食子酸和烟花苷对照品储备液1ml、2.5ml，加甲醇稀释，得到含烟花苷和没食子酸的混合对照品溶液，所含烟花苷的浓度为0.1328mg/ml、所含没食子酸的浓度为0.0650mg/ml；

2）供试品的制备

    精密称取1g睡莲花药材粉末，置于50ml具塞锥形瓶中，加入50ml甲醇，称重，超声提取30min，放冷后，称量质量并用甲醇补足质量差，过滤，置于样品瓶中，作为供试品溶液；

    3）含量测定

   测定睡莲花中没食子酸和烟花苷的含量时，采用没食子酸及烟花苷标准品做对照品，绘制进样量—色谱峰面积的标准曲线，测定睡莲花的色谱峰面积，从标准曲线上读出睡莲花中没食子酸及烟花苷的含量，其中，液相色谱测定峰面积的色谱条件为：色谱柱的直径和长度为4.6mm×250mm，5μm的Wondasil^TM C18，检测波长为270nm，流动相为甲醇和0.1%冰乙酸混合水溶液，柱温为30℃，流速为1mL/min，进样量为5μl，采样时间为50min，采用梯度洗脱。

优选的，所述步骤二的步骤2）中，所述过滤采用0.45μm微孔膜过滤。

进一步的，所述步骤二的步骤3）中，所述梯度洗脱具体为：流动相中0.1%冰乙酸的体积百分数随时间变化为0.01～10min，从90%线性降至75%；10～25min，从75%线性降至55%；25～35min，从55%线性降至45%；35～50min，从45%线性降至0%。

本发明的有益效果：

本发明公开了一种睡莲花中的没食子酸和烟花苷的含量测定及薄层分析方法，利用超声法提取睡莲花中的有效成分，采用HPLC法测定睡莲花中的没食子酸和烟花苷的含量，通过HPLC实验对睡莲花的成分进行了研究，并结合实际分离情况，确定了睡莲花的有效成分为没食子酸和烟花苷，亦为睡莲花的深入研究及临床应用提供一定的科学依据。该方法提供了一种定性鉴别方法和高效液相测定药物中没食子酸和烟花苷含量的方法，具有较强的专属性和良好的重现性（重复性试验中，供试品中没食子酸和烟花苷含量的RSD分别为0.354%、1.92%），真正体现了药品的安全有效性和质量可控性。本发明方法检测精准，误差小（精密度试验中5次对照品的没食子酸及烟花苷峰面积RSD分别为0.76%、0.98%）。可利用本申请的方法对睡莲花的质量进行检测控制。

附图说明

附图用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本发明的实施一起用于解释本发明，并不构成对本发明的限制。在附图中：

图1是在荧光灯365nm下睡莲花样品与没食子酸标准品薄层色谱图，其中，1为睡莲花样品，2为没食子酸标准品；

图2是在荧光灯365nm下睡莲花样品与烟花苷标准品薄层色谱图，其中，1、2为睡莲花样品，3为烟花苷标准品；

图3是混合标准品中没食子酸对照品的紫外光谱图；