[发明专利]四烯甲萘醌的柱层析提纯方法

说明书

技术领域

本发明涉及四烯甲萘醌的提纯领域，尤其是涉及四烯甲萘醌的柱层析提纯方法。

背景技术

维生素k2，又名：四烯甲萘醌，是一种脂溶性维生素，具有叶绿醌生物活性的萘醌基团的衍生物，是人体中不可缺少的重要维生素之一。四烯甲萘醌，目前国内没有成熟工艺。在国外，采用的是薄膜蒸馏的方法，进行产品的初步提纯。

发明内容

本发明提供一种四烯甲萘醌的柱层析提纯方法。

为实现上述的发明目的，本发明采取的实施方式如下：

四烯甲萘醌的柱层析提纯方法，其步骤如下：

（1）以烷烃类有机溶剂和与之极性稍强的有机溶剂配伍为洗脱剂；

（2）取100-400目硅胶于烧杯中，加入适量配置好的洗脱剂，充分搅拌后连续倒入硅胶柱中，采用柱长30-300厘米，直径5-100厘米的硅胶柱；

（3）循环冲洗：不断加入洗脱剂，反复冲洗，使得硅胶得以达到沉降均匀的效果，溶剂的高度应高于硅胶，随时从硅胶柱上方添加洗脱剂，硅胶柱下方流出的溶剂可以循环使用，观察硅胶高度不再下降；

（4）上样：四烯甲萘醌样品溶解在烃类溶剂中，质量浓度为15%-75%，将料液连续加入柱中，调整流速；

（5）接收样品：从柱上口慢慢加入洗脱剂，观察色带的变化，开始用样品瓶接层析液，同时用HPLC法检测层析液，开始接目的物，并收集产品，层析结束，若HPTLC法检测主产物斑点消失，停止层析，并用有机溶剂冲洗柱子，去除柱子中的吸附剂。

优选的，所述的洗脱剂中烷烃类有机溶剂为石油醚、正己烷、环己烷或溶剂汽油，与之极性稍强的有机溶剂为异丙醚、二氯甲烷或乙醚。

优选的，每次柱层析所用的物料和硅胶的比为：1:5-1:100。

本发明的有益效果是：提供了一种新的提纯四烯甲萘醌的方法，该方法工艺简单，提纯效果好，提纯成本低。

具体实施方式

以下结合实施例，对依据本发明提供的具体实施方式详述如下：

实施例1

1.材质：玻璃 有效柱高：1000mm

溶剂配置：环己烷：二氯甲烷=80:1

硅胶规格：200—300目 产地：青岛海胜化工

填充硅胶操作：取硅胶80g于1000ml烧杯中，加入适量上述配置好的溶剂，充分搅拌后连续倒入柱中。

2.循环冲洗：不断加入洗脱剂，反复冲洗，使得硅胶得以达到沉降均匀的效果。注意，溶剂的高度应高于硅胶，随时从柱子上方添加溶剂，柱子下方流出的溶剂可以循环使用，观察硅胶高度不再下降。

3.上样：

四烯甲萘醌样品，溶解在烃类溶剂中。将料液连续加入柱中，调整流速。

4.接收样品：

从柱上口慢慢加入洗脱剂，观察色带的变化，开始用样品瓶接层析液。

同时用HPLC法检测层析液，开始接目的物，并收集产品。

层析结束，若HPTLC法检测主产物斑点消失，停止层析，并用有机溶剂冲洗柱子，去除柱子中的吸附剂。

用HPLC法检测，取产品部分，然后集中浓缩，称重，最后计算浓缩物产率达到85.0%。。

实施例2

1.柱子材质：玻璃柱高：1000mm

            溶剂配置：正己烷：二氯甲烷=50:1

            硅胶规格：200—300目 产地：青岛海胜化工

            操作：取硅胶80g于1000ml烧杯中，加入适量上述配置好的溶剂，充分搅拌搅拌后连续倒入柱中。

2.循环冲洗：不断加入洗脱剂，反复冲洗，使得硅胶得以达到沉降均匀的效果。注意，溶剂的高度应高于硅胶，随时从柱子上方添加溶剂，柱子下方流出的溶剂可以循环使用，观察硅胶高度不再下降。

3.上样：

四烯甲萘醌样品，溶解在烃类溶剂中。

将料液连续加入柱中，调整流速。

4.接收样品：

从柱上口慢慢加入洗脱剂，观察色带的变化，开始用样品瓶接层析液。

同时用HPLC法检测层析液，开始接目的物，并收集产品。

层析结束，若HPTLC法检测主产物斑点消失，停止层析，并用有机溶剂冲洗柱子，去除柱子中的吸附剂。

用HPLC法检测，取产品部分，然后集中浓缩，称重，最后计算浓缩物产率达到82.9%。

以上对本发明的一个实施例进行了详细说明，但所述内容仅为本发明的较佳实施例，不能被认为用于限定本发明的实施范围。凡依本发明申请范围所作的均等变化与改进等，均应仍归属于本发明的专利涵盖范围之内。