[发明专利]一种疫苗组合物及其制备方法与应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种疫苗组合物及其制备方法与应用。

背景技术

猪瘟是猪的一种急性、热性、高度接触性传染病，主要特征是高温、微血管变性而引起全身出血、坏死、梗塞。早年又称猪霍乱，对猪危害极为严重，给养猪业造成重大损失。

副猪嗜血杆菌病是副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)引起的猪的多发性浆膜炎和关节炎,该病又称为猪革拉泽氏病(Glasser’s Disease)。副猪嗜血杆菌可以影响从2周龄到4月龄的青年猪,主要在断奶后和保育阶段发病,通常见于5～8周龄的猪,发病率可达40%,死亡率可达50%。主要临床症状表现为咳嗽、呼吸困难、消瘦、跛行和被毛粗乱;主要剖检病变表现为纤维素性胸膜炎、心包炎、腹膜炎、关节炎和脑膜炎等。根据我国血清流行病学调查和分离菌株的鉴定，以4、5型最为流行。近年来，由于我国目前饲养技术的调整进行不当,以及突发新的呼吸道综合征,使得该病日趋流行,危害日渐严重。

猪伪狂犬病是由疱疹病毒I型引起的一种急性传染病。可导致：怀孕母猪发生流产、死亡、产木乃伊胎及弱仔；新生仔猪发生大批急性死亡，伴有呕吐、腹泻及发抖，震颤和运动失调等神经症状，并产生免疫抑制，免疫抑制猪对其它疫病易感性增加，影响仔猪生长发育。除猪外，其他动物主要表现为发热、奇痒，脑脊髓炎的致死性感染，但对仔猪的危害最严重，15日龄内的仔猪死亡率达100%，因此本病给养猪业造成严重的损失。

根据近几年猪场流行病学研究结果显示，临床上表现为母猪相继出现流产、死胎、产木乃伊胎的情况，且产出的仔猪于产后不久相续出现精神沉郁、震颤、间歇性腹泻，粪便后期成黄色，有的发生呕吐和运动失调， 部分仔猪在发病后期皮肤出现出血点及皮下水肿等症状。并于不久死亡，病程1-7天，病死率100%。死亡猪剖检呈现眼睑肿胀，粘膜充血，肺有出血斑，肺间质增宽，肺组织呈肉样变化，淋巴结肿大，脾脏边缘有坏死小病灶，肠淋巴结呈大理石样变，胃底有大面积出血，肾表面有大小不一的出血点，心包炎、胸膜炎、腹膜炎和关节炎。从发病猪中分离出最常见的病原体是猪瘟、猪伪狂犬和副猪嗜血杆菌。

随着病原流行株和混合感染已经使现有疫苗及免疫程序很难达到预期的免疫效果，现在存在的问题是同时免疫两种活疫苗,猪伪狂犬病会干扰猪瘟前期抗体的产生：猪瘟抗体3周后才达到阳性,而猪伪狂犬病抗体在7d时就达到阳性（贺卫洁，河北农业大学，2010硕士论文）。而且，刘明亚（畜牧与兽医，2010，42卷2期：68-70）等研究发现，仔猪具有较高的母源抗体水平时,在一定时间接种猪瘟疫苗和伪狂犬疫苗后,仔猪体内的抗体水平迅速下降至较低水平并持续很长时间,而且下降后的抗体水平上升非常缓慢,使免疫猪产生一个免疫间隙期，因此在实际生产中各猪场不断调整免疫程序，单还是避免不了野毒感染的情况。

另外，猪瘟和伪狂犬病毒感染猪并发猪副猪嗜血杆菌后，发病呈急性，且死亡率很高。

目前市售商品疫苗需多次免疫，成本较高，对猪只的应激较大；而同时针对控制猪瘟、猪伪狂犬和副猪嗜血杆菌疫苗，国内外也还是空白。因此，需要发明猪瘟、猪伪狂犬和副猪嗜血杆菌疫苗以解决上述问题。

发明内容

发明人发现，如果用猪瘟、猪伪狂犬和副猪嗜血杆菌疫苗组合物进行滴鼻免疫，可以解决母源抗体干扰问题，产生对猪瘟、猪伪狂犬和副猪嗜血杆菌产生良好的免疫保护；应用时猪瘟、猪伪狂犬活疫苗和副猪嗜血杆菌灭活疫苗可以以灭活疫苗稀释活苗的方式使用，还可以按一定比例混合后加入冻干保护剂冻干使用，运输方便且不降低免疫效果；此外，还发现副猪嗜血杆菌灭活疫苗对猪瘟和猪伪狂犬疫苗有免疫增强作用，后者抗原减半也能达到和单苗使用一样的效果。

本发明的主要目的在于提供一种疫苗组合物，所述疫苗组合物包括：免疫量的猪瘟病毒抗原、免疫量的猪伪狂犬病病毒抗原和免疫量的副猪嗜血杆菌抗原。

优选地，所述猪瘟病毒抗原为活的形式的全病毒抗原、灭活的全病毒抗原、亚单位抗原、重组活载体抗原或合成肽抗原；所述猪伪狂犬病病毒抗原为减毒全病毒抗原、灭活的全病毒抗原、亚单位抗原、重组活载体抗原或合成肽抗原；所述副猪嗜血杆菌抗原为灭活全菌抗原、减毒全菌抗原、亚单位抗原、重组活载体抗原或合成肽抗原。