[发明专利]一种从栝楼茎叶中分离纯化对羟基苯甲酸甲酯及3-吲哚甲醛的方法

权利要求书

1.从栝楼茎叶中分离纯化对羟基苯甲酸甲酯及3-吲哚甲醛的方法，其特征是，步骤为：

（1）栝楼茎叶粗提物的制备：取粉碎好的栝楼茎叶，用乙醇-水溶液加热回流提取，提取液经减压回收至无醇后得到粗提物；

（2）萃取：将栝楼茎叶粗提物分散于水中，先后用等体积的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，石油醚、乙酸乙酯及正丁醇层分别减压浓缩，得石油醚部位、乙酸乙酯部位及正丁醇部位；

（3）反相C18柱分离纯化：将正丁醇部位用反相C18柱分离纯化，流动相为甲醇-水梯度洗脱，收集30%甲醇洗脱部分，浓缩后得样品1；收集35%甲醇洗脱部分，浓缩后得样品2；

（4）半制备型高效液相色谱分离纯化：将样品1和样品2分别用半制备型高效液相色谱进行分离纯化，色谱柱为C₁₈ SMB 100柱，流动相为甲醇-水（50：50，V/V），检测波长为254 nm，收集目标组分馏分，将得到的馏分减压浓缩，即得到所要分离的单体化合物。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征是，步骤（1）加热回流提取时间为1-3小时。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征是，步骤（1）加热回流提取时提取时间为1.5-2.5小时。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征是，步骤（1）加热回流提取时提取时间为2小时。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征是，步骤（1）提取次数为2-6次。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征是，步骤（1）提取次数为3-5次（优选4次）。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征是，步骤（1）加热回流提取时所用乙醇的质量浓度为50%-95%（优选60%-80%，更优选70%）。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征是，步骤（4）分离纯化用甲醇-水洗脱液进行洗脱，洗脱方式有甲醇-水梯度洗脱/45%甲醇-水等度洗脱/50%甲醇-水等度洗脱/55%甲醇-水等度洗脱。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征是，控制甲醇-水洗脱液流速为20-30 mL/min（优选25 mL/min）。