[发明专利]一种从栝楼茎叶中分离纯化对羟基苯甲酸甲酯及3-吲哚甲醛的方法

说明书

技术领域

本发明属于化工领域，具体是涉及一种从栝楼茎叶中分离纯化对羟基苯甲酸甲酯及3-吲哚甲醛的方法。

背景技术

葫芦科栝楼属植物栝楼（Trichosanthes kirilowii Marim.）和双边栝楼（Trichosanthes rosthorinii Harms）是中国药典规定的瓜蒌药材的原植物，其果实、果皮、种子和块根分别作瓜蒌、瓜蒌皮、瓜蒌子和天花粉入药。栝楼茎叶味酸、性寒、无毒，归肝、脾经，具有清热解暑的功效，可治疗中热伤暑、外感头热、头痛发热等症，药理实验表明其提取液能杀死体内腹水型癌细胞，具有抗癌作用。

有关栝楼的化学成分研究的报道很多，但是涉及栝楼茎叶的研究报道非常少。目前栝楼茎叶并没有得到充分的利用，大部分作为废弃物被丢弃，造成资源的极大浪费。为了深入研究栝楼茎叶的化学成分，开发新的药用资源，本发明提供了一种简单快速的从栝楼茎叶中分离纯化对羟基苯甲酸甲酯及3-吲哚甲醛的方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种简单快速的从栝楼茎叶中分离纯化对羟基苯甲酸甲酯及3-吲哚甲醛的方法。

本发明的方案如下：

从栝楼茎叶中分离纯化对羟基苯甲酸甲酯及3-吲哚甲醛的方法，其步骤为：

（1）栝楼茎叶粗提物的制备：取粉碎好的栝楼茎叶，用乙醇-水溶液加热回流提取，提取液经减压回收至无醇后得到粗提物；

（2）萃取：将栝楼茎叶粗提物分散于水中，先后用等体积的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，石油醚、乙酸乙酯及正丁醇层分别减压浓缩，得石油醚部位、乙酸乙酯部位及正丁醇部位；

（3）反相C18柱分离纯化：将正丁醇部位用反相C18柱分离纯化，流动相为甲醇-水梯度洗脱，收集30%甲醇洗脱部分，浓缩后得样品1；收集35%甲醇洗脱部分，浓缩后得样品2；

（4）半制备型高效液相色谱分离纯化：将样品1和样品2用半制备型高效液相色谱进行分离纯化，色谱柱为C₁₈ SMB 100柱，流动相为甲醇-水（50：50，V/V），检测波长为254 nm，收集目标组分馏分，将得到的馏分减压浓缩，即得到所要分离的单体化合物。 

前面所述的方法，优选的方案是，步骤（1）加热回流提取时提取时间为1-3小时，提取次数为2-6次。更加优选的是，提取时间为1.5-2.5小时（优选2小时），提取次数为3-5次（优选4次）。

前面所述的方法，优选的方案是，步骤（1）加热回流提取时所用乙醇的质量浓度为50%-95%（优选60%-80%，更优选70%）。

前面所述的方法，优选的方案是，步骤（4）用甲醇-水洗脱液进行洗脱时，所用甲醇的质量浓度为45%-55%（优选50%）。

前面所述的方法，优选的方案是，步骤（4）分离纯化用甲醇-水溶液进行洗脱，洗脱流速为20-30 mL/min（优选25 mL/min）。

本发明涉及从栝楼茎叶中分离纯化对羟基苯甲酸甲酯及3-吲哚甲醛的方法，步骤为：（1）栝楼茎叶粗提物的制备：取粉碎好的栝楼茎叶，用乙醇-水溶液加热回流提取，提取液经减压回收至无醇后得到粗提物。（2）萃取：将栝楼茎叶粗提物分散于水中，先后用等体积的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，石油醚、乙酸乙酯及正丁醇层分别减压浓缩，得石油醚部位、乙酸乙酯部位及正丁醇部位。（3）反相C18柱分离纯化：将正丁醇部位用反相C18柱分离纯化，流动相为甲醇-水梯度洗脱，收集30%甲醇洗脱部分，浓缩后得样品1；收集35%甲醇洗脱部分，浓缩后得样品2。（4）半制备型高效液相色谱分离纯化：将样品1和样品2分别用半制备型高效液相色谱进行分离纯化，色谱柱为C18 SMB 100柱（400 mm×25.4 mm I. D., 10 μm，成都格莱普科技有限公司），流动相为甲醇-水，检测波长为254 nm。该工艺过程绿色环保，对环境无严重危害，综合成本低。

本发明从栝楼茎叶中分离纯化对羟基苯甲酸甲酯及3-吲哚甲醛的方法，首先采用萃取的方法除去非极性及弱极性杂质，再用反相C18柱对样品进行粗分离，最后用半制备型高效液相色谱法进行精制，所得目标化合物的纯度高，杂质含量极低，这一点可从图6和图7中看出。除此之外，还具有如下优势：