[发明专利]分离脂肪组织活细胞方法、医药组合物及其用途、细胞库

说明书

本发明公开了一种分离脂肪组织活细胞方法、医药组合物及其用途、细胞库，以解决现有以手持刀具切碎脂肪组织作为分离脂肪组织中活细胞的前置步骤，仅能分离出少量活细胞且具较低的细胞存活率的缺点；本发明的方法包括：提供一脂肪组织；利用一切割装置将前述脂肪组织均质切碎；于前述已切碎的脂肪组织中加入一试剂进行水解；进一步离心分离；移除上清液，以获取一细胞沉淀物；借此，可缩短切碎脂肪组织的时间，且避免刀具重复使用造成污染，并提高自每单位重量的脂肪组织获得活细胞数，且不降低细胞存活率，作为分离脂肪组织活细胞的用途。

技术领域

本发明涉及一种分离脂肪组织活细胞方法、医药组合物及其用途、细胞库，尤其是指一种利用一切割装置将脂肪组织快速均质切碎，以利进一步自脂肪组织中分离出活细胞，以提高自每单位重量的脂肪组织获得活细胞数，且不降低细胞存活率。

背景技术

按，间叶干细胞的来源可自人体许多不同组织分离出来，例如由手术直接切除或经由抽脂手术取得的脂肪组织即为一干细胞丰富的来源，可分离出脂肪干细胞(Adiposetissue-derived stem cells, ADSCs)，其具有的优点有：取得方式侵入性低，对人体伤害小、且一次取得的量较多、可于体外增生培养等；加上脂肪干细胞亦拥有可分化成硬骨、软骨、肌肉以及脂肪细胞的潜力(Zuk et al., 2002)，因此，脂肪干细胞被认为是最具研究发展潜力的干细胞之一。

现今对于手术直接切除而得的块状脂肪组织切碎处理方式尚未有一套合适的自动化系统来搭配使用，而一般切碎处理方式有如中国台湾专利201331366号一种「体外无血清成体干细胞放大培养技术」，其方法中揭示经手术切脂取得脂肪组织块，并进一步利用手术刀具切碎该脂肪组织后与胶原蛋白酶酵素作用，再经分离可得基质血管层细胞(Stromalvascular fraction，SVF)，为基质细胞、血液细胞、血管内皮细胞与脂肪干细胞等共同组合而成。惟，其利用手术刀具切碎脂肪组织的步骤，需要耗费较多时间才得以将脂肪组织尽可能的切碎，以获取较多的基质血管层细胞；而操作切碎步骤的时间越长，对前述基质血管层细胞的存活率影响就越大，以至所获取的脂肪间质干细胞其存活率相对较低。此外，操作人员于操作不同来源检体时较容易因重复使用手术刀具而产生检体交叉污染的风险。

另如中国台湾专利201235471号「包含眼窝脂肪衍生的干细胞（ＯＦＳＣ）的细胞群及彼等的分离与应用」，其方法中揭示由眼眶内腔直接移除的眼窝组织中收集而得，或由眼睑内翻、眼睑外翻、眼睑下垂或眼袋的睑造型手术所收集而得的眼窝脂肪，可简易的使用剪刀或镊子支解该眼窝脂肪组织再与胶原蛋白酶酵素作用，再进行过滤、离心分离以获得细胞沉淀物，并将该细胞沉淀物进行细胞培养以获得具有群落形成能力的细胞。惟，该案所揭示的方法同样存在有使用剪刀或镊子支解该眼窝脂肪组织，需要耗费较多时间才得以将脂肪组织尽可能的切碎，以获取较多的细胞沉淀物；且相对地，其操作切碎步骤的时间越长，对前述细胞沉淀物中细胞的存活率的影响就越大。

综合上述，为了解决上述现有利用手术刀具进行脂肪组织切碎作业所带来的缺失，亟需要一可快速切碎脂肪组织以分离活细胞的方法，在不降低细胞存活率前提下，以进一步提高自每单位重量的脂肪组织取得活细胞数目。

发明内容

本发明的目的在于提供一种分离脂肪组织活细胞方法、医药组合物及其用途、细胞库，以期达到提高自每单位重量的脂肪组织取得活细胞数且不降低细胞存活率的目的。

为了达成上述目的，本发明的解决方案是：

一种分离脂肪组织活细胞方法，其包括有下列步骤：

步骤a提供一脂肪组织；

步骤b将该脂肪组织置于一切割装置的封闭容器中；

步骤c使该切割装置对该封闭容器施予一作用力，令该封闭容器中的一预设切削刀具对该脂肪组织执行快速均质切碎，获得一均质化脂肪组织；