[发明专利]一种鉴定造血干细胞移植术效果的试剂盒

权利要求书

1.一种鉴定造血干细胞移植术效果的试剂盒，包括组件A、组件B、组件C、组件D、组件E、组件F、组件G和组件H；所述组件A为用于制备骨髓单个核细胞的物质；所述组件B为用于培养骨髓间充质干细胞形成集落的物质；所述组件C为用于对骨髓间充质干细胞集落进行计数的物质；所述组件D为用于鉴定骨髓间充质干细胞是否具有分化成成骨细胞的能力的物质；所述组件E为用于鉴定骨髓间充质干细胞是否具有分化成成脂肪细胞的能力的物质；所述组件F为用于鉴定骨髓间充质干细胞是否具有抑制T淋巴细胞增殖的能力的物质；所述组件G为用于鉴定骨髓间充质干细胞是否具有作为造血干细胞的饲养细胞的能力的物质；

所述组件H为记载有如下判断标准的载体：如果满足如下（1）至（5），造血干细胞移植术后骨髓微环境重建成功：

（1）患者进行造血干细胞移植术后9个月的骨髓样本中的骨髓间充质干细胞数量与该患者进行造血干细胞移植术的预处理前的骨髓样本中的骨髓间充质干细胞数量没有显著差异；

（2）患者进行造血干细胞移植术后6个月的骨髓样本中的骨髓间充质干细胞具有分化成成骨细胞的能力；

（3）患者进行造血干细胞移植术后6个月的骨髓样本中的骨髓间充质干细胞具有分化成成脂肪细胞的能力；

（4）患者进行造血干细胞移植术后6个月的骨髓样本中的骨髓间充质干细胞具有抑制T淋巴细胞增殖的能力；

（5）患者进行造血干细胞移植术后6个月的骨髓样本中的骨髓间充质干细胞具有作为造血干细胞的饲养细胞的能力。

2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述组件A为人淋巴细胞分离液或所述组件A包括人淋巴细胞分离液。

3.如权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于：所述组件B为含5-20%体积份胎牛血清的低糖DMEM培养基或所述组件B包括含5-20%体积份胎牛血清的低糖DMEM培养基。

4.如权利要求1至3中任一所述的试剂盒，其特征在于：所述组件C为结晶紫或所述组件C包括结晶紫。

5.如权利要求1至4中任一所述的试剂盒，其特征在于：所述组件D包括成骨分化诱导液和碱性磷酸酶染色试剂。

6.如权利要求1至5中任一所述的试剂盒，其特征在于：所述组件E包括成脂肪分化诱导液和油红O。

7.如权利要求1至6中任一所述的试剂盒，其特征在于：所述组件F包括离体的人CD3⁺T淋巴细胞和CFSE。

8.如权利要求1至7中任一所述的试剂盒，其特征在于：所述组件G包括离体的人CD34⁺造血干细胞、含5-20%（具体可为10％）体积份胎牛血清的低糖DMEM培养基和造血干细胞集落专用培养基。

9.如权利要求1至8中任一所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括PBS缓冲液。所述PBS缓冲液具体可为pH7.4、1M的PBS缓冲液组成。