[发明专利]表达猪繁殖与呼吸综合征病毒游离受体重组腺病毒组及其制备与应用有效
| 申请号： | 201310485894.3 | 申请日： | 2013-10-16 |
| 公开（公告）号： | CN103525775A | 公开（公告）日： | 2014-01-22 |
| 发明（设计）人： | 孙怀昌;陈阳;郭睿;张鑫宇;夏晓莉 | 申请（专利权）人： | 扬州大学 |
| 主分类号： | C12N7/01 | 分类号： | C12N7/01;A61K39/12;A61K31/14 |
| 代理公司： | 南京知识律师事务所 32207 | 代理人： | 卢亚丽 |
| 地址： | 225009 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 表达 繁殖 呼吸 综合征 病毒 游离 受体 重组 病毒组 及其 制备 应用 | ||
1.表达猪繁殖与呼吸综合征病毒游离受体重组腺病毒组，是由表达猪唾液酸粘附素前4个IgV结构域和与猪IgG Fc片段融合蛋白的重组腺病毒，及表达脱衣壳受体CD163第5-9个SRCR结构域与猪IgG Fc片段融合蛋白的重组腺病毒组成。
2.权利要求1所述重组腺病毒组在制备防治猪繁殖与呼吸综合征制剂中的应用。
3.权利要求1所述表达猪繁殖与呼吸综合征病毒游离受体重组腺病毒组的制备方法，其步骤如下：
（1）用化学合成法合成猪IgG重链信号肽序列，用反转录聚合酶链式反应扩增猪IgG Fc片段、唾液酸粘附素前4个IgV结构域Sn4D和CD163第5-9个结构域SRCR59编码序列。
（2）将Sn4D与Fc融合序列插入腺病毒载体pShuttle-CMV，获得重组载体pShuttle-Sn4D-Fc；将猪IgG信号肽、SRCR59与Fc融合序列插入腺病毒载体pShuttle-CMV，获得重组载体pShuttle-SRCR59-Fc.
（3）用步骤（2）获得的两种重组载体转染AAV-293细胞，获得重组腺病毒rAd-Sn4D-Fc和rAd-SRCR59-Fc。
(4)用AAV-293细胞扩增重组腺病毒。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤（2）是：将猪IgG Fc片段编码序列分别与Sn4D、SRCR59编码序列融合，用Sn自身信号肽引导Sn4D-Fc融合蛋白分泌性表达，以猪IgG重链信号肽引导SRCR59-Fc融合蛋白分泌性表达。
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